Year 2016

• Characterization of recombinant homocitrate synthase from Candida albicans

  Publication

  • I. Gabriel
  • S. Milewski

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2016

  LYS21 and LYS22 genes from Candida albicans encoding isoforms of homocitrate synthase (HCS), an enzyme catalyzing the first committed step in the L-lysine biosynthetic pathway, were cloned and expressed as NoligoHistagged fusion proteins in Escherichia coli. The purified gene products revealed HCS activity, i.e. catalyzed the condensation of α-ketoglutarate with acetyl-coenzyme A to yield homocitrate. The recombinant enzymes were purified...

  Full text to download in external service

Year 2015

• Isolation of the GFA1 gene encoding glucosamine-6-phosphate synthase of Sporothrix schenckii and its expression in Saccharomyces cerevisiae

  Publication

  • J. F. Sánchez-López
  • J. Gonzalez-Ibarra
  • A. Álvarez-Vargas
  • S. Milewski
  • J. Villagomez-Castro
  • C. Cano-Canchola
  • E. Lopez-Romero

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2015

  Glucosamine-6-phosphate synthase (GlcN-6-P synthase) is an essential enzyme involved in cell wall biogenesis that has been proposed as a strategic target for antifungal chemotherapy. Here we describe the cloning and functional characterization of Sporothrix schenckii GFA1 gene which was isolated from a genomic library of the fungus. The gene encodes a predicted protein of 708 amino acids that is homologous to GlcN-6-P synthases...

  Full text to download in external service

Year 2008

• Extracellular secretion of Pseudoalteromonas sp. cold-adapted esterase in Escherichia coli in the presence of Pseudoalteromonas sp. components of ABC transport system

  Publication

  • A. Długołęcka
  • H. Cieśliński
  • M. Turkiewicz
  • A. Białkowska
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2008

  Enzymy lipolityczne, głównie lipazy i esterazy, stanowią cenną grupę biokatalizatorów wykorzystywanych w przemyśle. Coraz większe zainteresowanie tą klasą enzymów sprawiło, że poszukuje się alternatywnych źródeł ich pozyskiwania. W celu zbadania wpływu białek transportu ABC Pseudoalteromonas sp. 643A na ekspresję genu, sekrecję i aktywność esterazy EstA z tego mikroorganizmu w systemie ekspresyjnym E. coli skonstruowano układ do...

  Full text to download in external service

Year 2007

• A two-plasmid Escherichia coli system for expression of Dr adhesins

  Publication

  • M. Kur
  • R. Piątek
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2007

  Praca opisuje konstrukcję wydajnego systemu produkcji fimbrii Dr. System składa się z dwóch plazmidów. Plazmid pACYCpBAD-DraC-C-His zawiera pod kontrolą promotora arabinozowego gen draC kodujący białko kanałotwórcze DraC. Plazmid pET-30b-sygDraBE zawiera pod kontrolą promotora T7lac geny draB i draE kodujące odpowiednio białko opiekuńcze DraB oraz adhezynę DraE. Oba plzamidy posiadają różne ori replikacji co pozwala na ich jednoczesne...

• Identification, cloning, expression, and characterizationof a highly thermostable single-stranded-DNA-binding protein (SSB) from Deinococcus murrayi

  Publication

  • P. Filipkowski
  • A. Duraj-Thatte
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2007

  Zidentyfikowano i scharakteryzowano białko SSB-podobne, pochodzące z Deinococcus murrayi (DmuSSB). Otrzymany w reakcji PCR fragment zawierający kompletny gen ssb sklonowano w systemie ekspresyjnym Escherichia coli. Gen składa się z 826 nt, kodujących 276 reszt aminokwasowych z wyliczoną teoretycznie masą cząsteczkową monomeru równą 30,14 kDa. DmuSSB zawiera dwie domeny wiążące jednoniciowe DNA OBna monomer I funkcjonuje jako homodimer....

  Full text to download in external service

Year 2006

• Construction, purification, and functional characterization of His-tagged Candida albicans glucosamine-6-phosphate synthase expressed in Escherichia coli

  Publication

  • J. Olchowy
  • K. Kur
  • P. Sachadyn
  • S. Milewski

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2006

  Full text to download in external service

• Novel method of expression and purification of hirudin based on pBAD TOPO, pTYB12 vectors and gene synthesis

  Publication

  • R. Kochanowski
  • R. Kotlowski (formerly: R. Kotłowski)
  • P. Szweda

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2006

  W pracy przedstawiono nową, szybką i tanią metodę otrzymywania, ekspresji i oczyszczania białka hirudyny naturalnie izolowanego z ślinianek pijawki lekarskiej. Hirudyna pełni funkcje bezpośredniego inhibitora trombiny, głównego białka biorącego udział w tworzeniu skrzepów krwi. Właściwości te wykorzystywane są od wielu lat w klinice. Opracowana metoda pozwoliła uzyskać 17 mg/l hodowli E. coli białka o wysokiej czystości i aktywności...

Year 2003

• Construction and purification of his6-Thermus thermophilus MutS protein

  Publication

  • A. Stanisławska-Sachadyn
  • P. Sachadyn
  • R. Jędrzejczak
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2003

  Full text to download in external service

• Construction and purification of his6-Thermus thermophilus MutS protein.

  Publication

  • A. Stanisławska-Sachadyn
  • P. Sachadyn
  • R. Jędrzejczak
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2003

  Gen mutS z termofilnej bakterii Thermus thermophilus zamplifikowano przy użyciu PCR, sklonowano i przeprowadzono jego ekspresję w E. coli. Rekombinantowe białko MutS zawierające oligohistydynową domenę na N-końcu oczyszczono w jednoetapowej procedurze przy wykorzystaniu chromatografii powinowactwaNi(2+). Zdolność do rozpoznania niekomplementarności białka his(6)-MutS potwierdzono w eksperymentach ochrony DNA przed trawieniem...

• High level expression, secretion and purification of the termostable aqualysin I from Thermus aquaticus YT-1 in Pichia pastoris.

  Publication

  • G. Olędzka
  • S. Dąbrowski
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2003

  Otrzymano aktywną proteazę serynową Thermus aquaticus z systemu nadprodukcji Escherichia coli. Oczyszczono enzym przy zastosowaniu chromatografii metalo-powinowactwa.

• High yield expression and single step purification of Toxoplasma gondii SAG1, GRA1, GRA7 antigens in Escherichia coli.

  Publication

  • E. Hiszczyńska-Sawicka
  • A. Brillowska-Dąbrowska
  • S. Dąbrowski
  • H. Pietkiewicz
  • P. Myjak
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2003

  Praca przedstawia metodę uzyskiwania antygenów rekombinowanych Toxoplasmagondii o wysokiej czystości, które można zastosować w immunodiagnostyce. Antygeny T. gondii eksprymowane w komórkach E. coli zawierały polihistydynowedomeny fuzyjne na końcu N i C białka. Pozwalało to na jednoetapowe oczyszczanie białek metodą chromatografii metalopowinowactwa na złożu Ni2+ -IDA-Sepharose. Immunoreaktywność antygenów rekombinowanych...

Year 2002

• Novel thermostable ssDNA-binding proteins from Thermus thermophilus and T. aquaticus-expression and purification

  Publication

  • S. Dąbrowski
  • M. Olszewski
  • R. Piątek
  • J. Kur

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2002

  Sklonowano w system ekspresyjny pET-30LIC Escherichia coli gen kodujący białka SSB-podobne Thermus thermophilus i T. aquaticus. Oczyszczono do homogenności białka SSB-podobne, a uzyskane preparaty umożliwiają wykonanie badań strukturalnych w/w białek.

Year 2000

• Purification to Homogeneity of Candida albicans Glucosamine-6-phosphate Synthase Overexpressed in Escherichia coli

  Publication

  • P. Sachadyn
  • R. Jędrzejczak
  • S. Milewski
  • J. Kur
  • E. Borowski

  - PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION - Year 2000

  Full text to download in external service