Properties of recombinant trehalose synthase from Deinococcus radiodurans expressed in Escherichia coli
Abstrakt
A trehalose synthase gene from Deinococcus radiodurans(DSMZ 20539)containing 1659 bp reading frame encoding 552 amino acids was amplified using PCR. The gene was finally ligated into pET30Ek/LIC vector and expressed after isopropyl β-d-thiogalactopyranoside induction in Escherichia coli (DE3) Rosetta pLysS. The recombinanttrehalose synthase (DraTreS) containing a His6-tag at the C-terminus was purified by metal affinity chromatography and characterized. The expressed enzyme is a homodimer with molecular mass of 126.9 kDa and exhibits the highest activity of 11.35 U/mg at pH 7.6 and at 30oC.DraTreS activity was almost unchanged after 2 h preincubation at 45oC and pH 7.6, and retained about 56% of maximal value after 8 h incubation at 50oC. The DraTreS was strongly inhibited by Cu2+, Hg2+, Zn2+, Al3+ and 10mM Tris. The Km value of maltose conversion was 290.7 mM.
Autorzy (4)
Cytuj jako
Pełna treść
- Wersja publikacji
- Accepted albo Published Version
- Licencja
- otwiera się w nowej karcie
Słowa kluczowe
Informacje szczegółowe
- Kategoria:
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ:
- artykuł w czasopiśmie wyróżnionym w JCR
- Język:
- angielski
- Rok wydania:
- 2012
- Opis bibliograficzny:
- Filipkowski P., Pietrow-Tobiszewska O., Panek A., Synowiecki J.: Properties of recombinant trehalose synthase from Deinococcus radiodurans expressed in Escherichia coli// Acta Biochimica Polonica.. -Vol. 59, nr. No.3 (2012), s.425-431
- Weryfikacja:
- Politechnika Gdańska
wyświetlono 110 razy
Publikacje, które mogą cię zainteresować
Expression of Deinococcus geothermalis Trehalose Synthase Gene in Escherichia coli and Its Enzymatic Properties
- P. Filipkowski,
- A. Panek,
- A. Felczykowska
- + 2 autorów