Search
Extracellular secretion of Pseudoalteromonas sp. cold-adapted esterase in Escherichia coli in the presence of Pseudoalteromonas sp. components of ABC transport system
Abstract
Enzymy lipolityczne, głównie lipazy i esterazy, stanowią cenną grupę biokatalizatorów wykorzystywanych w przemyśle. Coraz większe zainteresowanie tą klasą enzymów sprawiło, że poszukuje się alternatywnych źródeł ich pozyskiwania. W celu zbadania wpływu białek transportu ABC Pseudoalteromonas sp. 643A na ekspresję genu, sekrecję i aktywność esterazy EstA z tego mikroorganizmu w systemie ekspresyjnym E. coli skonstruowano układ do koekspresji genu esterazy i trzech komponentów systemu sekrecji typu I. Dla wydajnej ekspresji genu esterazy EstA wybrano wektor pET30b(+), którego liczba kopii przypadająca na komórkę gospodarza jest stosunkowo wysoka. Do ekspresji genów abc1, abc2, abc3 w układzie tricistronowym wykorzystano niskokopijny wektor ekspresyjny pACYC-pBAD, a w celu zwiększenia wydajności translacji poszczególnych cistronów wprowadzono sekwencje wiązania rybosomu. Wykazano, że komponenty transportu ABC wpływają na wzrost aktywności esterazy EstA, wydzielanej na zewnątrz komórek E. coli. Stwierdzono, że za proces fałdowania enzymu prawdopodobnie odpowiedzialne jest białko ABC3, a białka ABC1 i ABC2 pełnią w tym wypadku funkcje pomocnicze.
Citations
-
7
CrossRef
-
0
Web of Science
-
9
Scopus
Authors (5)
Cite as
Full text
full text is not available in portal
Keywords
Details
- Category:
- Articles
- Type:
- artykuł w czasopiśmie z listy filadelfijskiej
- Published in:
-
PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION
no. 62,
pages 179 - 184,
ISSN: 1046-5928 - Language:
- English
- Publication year:
- 2008
- Bibliographic description:
- Długołęcka A., Cieśliński H., Turkiewicz M., Białkowska A., Kur J.: Extracellular secretion of Pseudoalteromonas sp. cold-adapted esterase in Escherichia coli in the presence of Pseudoalteromonas sp. components of ABC transport system// PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION. -Vol. 62., nr. iss. 2 (2008), s.179-184
- DOI:
- Digital Object Identifier (open in new tab) 10.1016/j.pep.2008.07.006
- Verified by:
- Gdańsk University of Technology
seen 122 times
Recommended for you
A cold-adapted esterase from psychrotrophic Pseudoalteromonas sp. strain 643A
- H. Cieśliński,
- A. Białkowska,
- A. Długołęcka
- + 5 authors
Oligopeptide antifungals are exceptionally active against multidrug-resistant yeast
- R. Wakieć,
- J. W. Payne,
- J. Becker
- + 1 authors