Isolation of the GFA1 gene encoding glucosamine-6-phosphate synthase of Sporothrix schenckii and its expression in Saccharomyces cerevisiae
Abstrakt
Glucosamine-6-phosphate synthase (GlcN-6-P synthase) is an essential enzyme involved in cell wall biogenesis that has been proposed as a strategic target for antifungal chemotherapy. Here we describe the cloning and functional characterization of Sporothrix schenckii GFA1 gene which was isolated from a genomic library of the fungus. The gene encodes a predicted protein of 708 amino acids that is homologous to GlcN-6-P synthases from other sources. The recombinant enzyme restored glucosamine prototrophy of the Saccharomyces cerevisiae gfa1 null mutant. Purification and biochemical analysis of the recombinant enzyme revealed some differences from the wild type enzyme, such as improved stability and less sensitivity to UDP-GlcNAc. The sensitivity of the recombinant enzyme to the selective inhibitor FMDP [N3-(4- methoxyfumaroyl)-L-2,3-diaminopropanoic acid] and other properties were similar to those previously reported for the wild type enzyme.
Cytowania
-
5
CrossRef
-
0
Web of Science
-
5
Scopus
Autorzy (7)
Cytuj jako
Pełna treść
pełna treść publikacji nie jest dostępna w portalu
Słowa kluczowe
Informacje szczegółowe
- Kategoria:
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ:
- artykuł w czasopiśmie wyróżnionym w JCR
- Opublikowano w:
-
PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION
nr 110,
strony 57 - 64,
ISSN: 1046-5928 - Język:
- angielski
- Rok wydania:
- 2015
- Opis bibliograficzny:
- Sánchez-López J., Gonzalez-Ibarra J., Álvarez-Vargas A., Milewski S., Villagomez-Castro J., Cano-Canchola C., Lopez-Romero E.: Isolation of the GFA1 gene encoding glucosamine-6-phosphate synthase of Sporothrix schenckii and its expression in Saccharomyces cerevisiae// PROTEIN EXPRESSION AND PURIFICATION. -Vol. 110, (2015), s.57-64
- DOI:
- Cyfrowy identyfikator dokumentu elektronicznego (otwiera się w nowej karcie) 10.1016/j.pep.2014.12.002
- Weryfikacja:
- Politechnika Gdańska
wyświetlono 107 razy
Publikacje, które mogą cię zainteresować
Glucosamine-6-phosphate synthase with an oligoHis insert
- K. Kwiatkowska,
- J. Czarnecka,
- M. Wojciechowski
- + 1 autorów
Sporothrix schenckii: purification and partial biochemical characterisation of glucosamine-6-phosphate synthase, a potential antifungal target
- J. Gonzalez-Ibarra,
- S. Milewski,
- J. Villagomez-Castro
- + 2 autorów
Engineering Candida albicans glucosamine-6-phosphate synthase for efficient enzyme purification
- J. Czarnecka,
- K. Kwiatkowska,
- I. Gabriel
- + 2 autorów
Construction of glucosamine-6-phosphate synthase with an internal hexahistydyl fragment
- K. Kwiatkowska,
- J. Czarnecka