Wyszukiwarka
Cloning, expression in Komagataella phaffii, and biochemical characterization of recombinant sequence variants of Pseudomonas sp. S9 GDSL-esterase
Abstrakt
Two recombinant Komagataella phaffii (formerly Pichia pastoris) yeast strains for production of two sequential variants of EstS9 esterase from psychrotolerant bacterium Pseudomonas sp. S9, i.e. αEstS9N (a two-domain enzyme consisting of a catalytic domain and an autotransporter domain) and αEstS9Δ (a single-domain esterase) were constructed. However, only one of recombinant K. phaffii strains, namely Komagataella phaffii X-33/pPICZαestS9Δ, allowed to successfully produce and secrete recombinant αEstS9Δ enzyme outside of the host cell. The purified αEstS9Δ esterase was active towards short-chain p-nitrophenyl esters (C2-C8), with optimal activity for the acetate (C2) ester. The single-domain αEstS9Δ esterase exhibits the highest activity at 60oC and pH 9.5. In addition, the enzyme retains 90% of its activity after 3 hour incubation at 70–90oC. What should be also noted is that αEstS9Δ esterase produced in the K. phaffii expression system has a much higher specific activity (0.069 U/mg of protein) than the recombinant EstS9Δ esterase produced in an E. coli expression system (0.0025 U/mg of protein) (Wicka et al., 2016, Acta Biochim Pol 63: 117–125. https://doi.org/10.18388/ abp.2015_1074).
Cytowania
-
1
CrossRef
-
0
Web of Science
-
2
Scopus
Autorzy (3)
Cytuj jako
Pełna treść
- Wersja publikacji
- Accepted albo Published Version
- DOI:
- Cyfrowy identyfikator dokumentu elektronicznego (otwiera się w nowej karcie) 10.18388/abp.2020_5730
- Licencja
-
otwiera się w nowej karcie
Słowa kluczowe
Informacje szczegółowe
- Kategoria:
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ:
- artykuły w czasopismach
- Opublikowano w:
-
Acta Biochimica Polonica
nr 68,
strony 411 - 417,
ISSN: 0001-527X - Język:
- angielski
- Rok wydania:
- 2021
- Opis bibliograficzny:
- Wicka-Grochocka M., Cieśliński H., Wanarska M.: Cloning, expression in Komagataella phaffii, and biochemical characterization of recombinant sequence variants of Pseudomonas sp. S9 GDSL-esterase// Acta Biochimica Polonica -Vol. 68,iss. 3 (2021), s.411-417
- DOI:
- Cyfrowy identyfikator dokumentu elektronicznego (otwiera się w nowej karcie) 10.18388/abp.2020_5730
- Weryfikacja:
- Politechnika Gdańska
wyświetlono 135 razy
Publikacje, które mogą cię zainteresować
Structure of EstA esterase from psychrotrophic Pseudoalteromonas sp. 643A covalently inhibited by monoethylphosphonate.
- A. Brzuszkiewicz,
- E. Nowak,
- Z. Dauter
- + 4 autorów