Search
Versatile method employing basic techniques of genetic engineering to study the ability of low molecular weight compounds to bind covalently with DNA in cell free systems.
Abstract
Mechanizm działania większości leków przeciwnowotworowych oraz związków rakotwórczych polega na ich kowalencyjnym wiązaniu z DNA. Poziom tego wiązania jest zazwyczaj bardzo niski, co powoduje, że potrzebne są niezwykle czułe metody aby kowalencyjna modyfikacja mogła być w ogóle wykryta. My podjęliśmy próbę zastosowania w tym celu prostych, szybkich i sprawdzonych technik inżynierii genetycznej: metody PCR do uzyskania fragmentu DNA o określonej sekwencji nukleotydów, trawienia enzymami restrykcyjnymi oraz elektroforezy w żelach poliamidowych. Kowalencyjna modyfikacja miejsc restrykcyjnych powoduje, że przestają one być substratem dla odpowiedniej restryktazy i nie zachodzi cięcie DNA. Fakt ten można łatwo wykryć po przeprowadzeniu elektroforezy produktu PCR poddanego najpierw reakcji z badanym związkiem, a następnie działaniu enzymów restrykcyjnych. Weryfikację powyższej metody przeprowadzono przy użyciu produktu PCR poddanego reakcji z modelowymi związkami wiążącymi się kowalencyjnie z DNA: cisplatyną oraz CC-1065.
Citations
-
4
CrossRef
-
0
Web of Science
-
4
Scopus
Authors (3)
Cite as
Full text
full text is not available in portal
Keywords
Details
- Category:
- Articles
- Type:
- artykuł w czasopiśmie z listy filadelfijskiej
- Published in:
-
ANALYTICAL BIOCHEMISTRY
no. 313,
pages 53 - 59,
ISSN: 0003-2697 - Language:
- English
- Publication year:
- 2003
- Bibliographic description:
- Bartoszek-Pączkowska A., SIELENKO A., Węsiora M.: Versatile method employing basic techniques of genetic engineering to study the ability of low molecular weight compounds to bind covalently with DNA in cell free systems.// ANALYTICAL BIOCHEMISTRY. -Vol. 313., (2003), s.53-59
- DOI:
- Digital Object Identifier (open in new tab) 10.1016/s0003-2697(02)00564-x
- Verified by:
- Gdańsk University of Technology
seen 125 times
Recommended for you
Quantification of Radiation-Induced Single-Strand Breaks in Plasmid DNA using a TUNEL/ELISA-Based Assay
- M. Śmiałek-Telega,
- S. A. Moore,
- N. J. Mason
- + 1 authors