Versatile method employing basic techniques of genetic engineering to study the ability of low molecular weight compounds to bind covalently with DNA in cell free systems.
Abstrakt
Mechanizm działania większości leków przeciwnowotworowych oraz związków rakotwórczych polega na ich kowalencyjnym wiązaniu z DNA. Poziom tego wiązania jest zazwyczaj bardzo niski, co powoduje, że potrzebne są niezwykle czułe metody aby kowalencyjna modyfikacja mogła być w ogóle wykryta. My podjęliśmy próbę zastosowania w tym celu prostych, szybkich i sprawdzonych technik inżynierii genetycznej: metody PCR do uzyskania fragmentu DNA o określonej sekwencji nukleotydów, trawienia enzymami restrykcyjnymi oraz elektroforezy w żelach poliamidowych. Kowalencyjna modyfikacja miejsc restrykcyjnych powoduje, że przestają one być substratem dla odpowiedniej restryktazy i nie zachodzi cięcie DNA. Fakt ten można łatwo wykryć po przeprowadzeniu elektroforezy produktu PCR poddanego najpierw reakcji z badanym związkiem, a następnie działaniu enzymów restrykcyjnych. Weryfikację powyższej metody przeprowadzono przy użyciu produktu PCR poddanego reakcji z modelowymi związkami wiążącymi się kowalencyjnie z DNA: cisplatyną oraz CC-1065.
Cytowania
-
4
CrossRef
-
0
Web of Science
-
4
Scopus
Autorzy (3)
Cytuj jako
Pełna treść
pełna treść publikacji nie jest dostępna w portalu
Słowa kluczowe
Informacje szczegółowe
- Kategoria:
- Publikacja w czasopiśmie
- Typ:
- artykuł w czasopiśmie z listy filadelfijskiej
- Opublikowano w:
-
ANALYTICAL BIOCHEMISTRY
nr 313,
strony 53 - 59,
ISSN: 0003-2697 - Język:
- angielski
- Rok wydania:
- 2003
- Opis bibliograficzny:
- Bartoszek-Pączkowska A., SIELENKO A., Węsiora M.: Versatile method employing basic techniques of genetic engineering to study the ability of low molecular weight compounds to bind covalently with DNA in cell free systems.// ANALYTICAL BIOCHEMISTRY. -Vol. 313., (2003), s.53-59
- DOI:
- Cyfrowy identyfikator dokumentu elektronicznego (otwiera się w nowej karcie) 10.1016/s0003-2697(02)00564-x
- Weryfikacja:
- Politechnika Gdańska
wyświetlono 127 razy
Publikacje, które mogą cię zainteresować
Quantification of Radiation-Induced Single-Strand Breaks in Plasmid DNA using a TUNEL/ELISA-Based Assay
- M. Śmiałek-Telega,
- S. A. Moore,
- N. J. Mason
- + 1 autorów