Activity assay of O-Acetyl-L-homoserine sulfhydrylase (CaMet15p).

Opis

The study aimed to obtain conditions optimal for the activity of O-acetyl-L-homoserine sulfhydrylase (CaMet15p) and a method suitable for its measurement. The selection of appropriate reaction conditions included the identification of the reaction buffer and its pH, substrate and enzyme concentrations. The activity of CaMet15p was measured by the detection of product L-homocysteine (HCT) via LC/MS system with pre-column derivatization. Mass spectra were recorded using an Agilent 6470A triple quadrupole (6470 Triple Quad LC/MS, Agilent Technologies, Waldbronn, Germany) LC/MS system (1260 Infinity II, Agilent Technologies,Waldbronn, Germany) with electrospray ionization source (ESI). HCT reacts with 5,5’-dithiobis(2-nitrobenzoic acid) (DTNB) to produce a HCT-TNB complex, that can be also detected by the diode array detector (HPLC-DAD). Optimal conditions for HCT-TNB complex detection included identification of mobile phase, elution profile, injection volume, and most suitable wavelengths for the detection have been identified.
This dataset contains the description of the methodology, and the set of selected chromatographs obtained for control as well as enzymatic reaction samples.
The studies were financially supported by the project OPUS 20 financed by the National Science Centre (No. UMO-2020/39/B/NZ7/01519).

Plik z danymi badawczymi

Activity assay of O-Acetyl-L-homoserine sulfhydrylase.zip

806.8 kB, S3 ETag 53acbd253acdb11797ce5fe37937ed1e-1, pobrań: 58

Hash pliku liczony jest ze wzoru
hexmd5(md5(part1)+md5(part2)+...)-{parts_count} gdzie pojedyncza część pliku jest wielkości 512 MB

Przykładowy skrypt do wyliczenia:
https://github.com/antespi/s3md5

pobierz

Informacje szczegółowe o pliku

Licencja:: otwiera się w nowej karcie

CC BY

Uznanie autorstwa
Dane surowe:: Dane zawarte w datasecie nie zostały w żaden sposób przetworzone.

Informacje szczegółowe

Rok publikacji:

2023

Data zatwierdzenia:

2023-08-22

Język danych badawczych:

angielski

Dyscypliny:

nauki chemiczne (Dziedzina nauk ścisłych i przyrodniczych)

DOI:

10.34808/4ta6-e594

Finansowanie:

Enzymy szlaku biosyntezy L-metioniny jako nowe cele molekularne dla chemoterapii przeciwgrzybowej

Weryfikacja:

Politechnika Gdańska

Słowa kluczowe

Powiązane zasoby

dane badawcze Assay of Cystathionine-γ-synthase (CaStr2p) activity determination.

Cytuj jako

Autorzy

wyświetlono 156 razy

Wyszukiwarka