Search
prof. dr hab. Józef Synowiecki
Publications
Filters
total: 48
Catalog Publications
Year 2013
-
Effects of the polyhistidine tag on kinetics and other properties of trehalose synthase from Deionococcus geothermalis
PublicationTwo recombinant trehalose synthases from Deinococcus geothermalis (DSMZ 11300) were compared. A significant influence of the artificial polyhistidine tag was observed in protein constitution. The recombinant trehalose synthase from D. geothermalis with His6 -tag has a higher K m value of 254 mM, in comparison with the wild-type trehalose synthase (K m 170 mM), and displayed a lower activity of maltose conversion when compared...
-
Extracellular proteolytic activity of Deinococcus geothermalis
PublicationProduction of extracellular protease by extremophilic bacteria Deinococcus geothermalis cultivated in liquid media containing 0.1% (w/v) of peptone K, 0.1% yeast extract and 0.2% marine salt reached a maximum in 14 h of the cell growth at 45°C and pH 8.0. The enzyme was purified by a two-step procedure using fractionation by a graded ammonium sulphate precipitation technique and gel filtration on Sephadex G-100 column. Protease...
-
Immobilization on magnetic nanoparticles of therecombinant trehalose synthase from Deinococcusgeothermalis
PublicationtIn our study the gene encoding trehalose synthase from Deinococcus geothermalis was cloned and overexpressed inEscherichia coli Rosetta (DE3)pLysS. Wild-type trehalose synthase has been purified from host protein after cell dis-ruption and precipitation at 20% ammonium sulphate saturation. Recombinant trehalose synthase was immobilizedonto glutaraldehyde activated silanized magnetic ferrous-ferric oxide by using covalent binding...
Year 2012
-
Characterization of glucoamylase immobilized on magnetic nanoparticles
PublicationMagnetic support was prepared by precipitation from an alkaline solution of divalent and trivalent iron ions and subsequently was modified with 3-aminopropyltriethoxysilane. FTIR analysis showed existence of a new Si-O-Fe bond in obtained particles. Scanning electronic microscopy images shows that the nanoparticles of all samples have particle size below 30 nm. Glucoamylase AMG 300L was immobilized onto the modified magnetic support...
-
Chemical composition of shells from red (Strongylocentrotus franciscanum) and green (Strongylocentrotus droeba-chiensis) sea urchin
PublicationThe shells from red and green sea urchins accounted for 47.9 and 40.7% of their body weights, respectively. The red and green sea urchin shells contained 91.08 and 90.77% minerals and 4.06 and 4.99% proteins, respectively. The shells did not contain any chitin. Sea urchin shells had a relatively large amount of naphthoquinone pigments, 121 mg per 100 g in red and 163 mg per 100 g in green species. The small quantities of glucosamine...
-
Cloning, Expression and Purification of Wild-Type Trehalose Synthase from Deinococcus geothermalis
PublicationThe aim of this study was isolation and cloning of trehalose synthase gene derived from extremophilic microorganism to the expression vectors in the Tabor-Studier system and its expression in Rosetta(DE3)pLysS Escherichia coli cells. The second phase of the study consisted of proteins purification using an initial denaturation of host proteins and salting-out proteins by ammonium sulfate.
-
Enzyme immobilization on magnetic nanoparticles
PublicationImmobilized enzymes have been commonly used in many branches of industry, biotechnology, medicine and also in analytical chemistry. Their use provides many advantages in comparison with free enzymes including repeated, easy recovery of the enzyme and improvement in enzyme stability. Enzymes are strong and specific catalysts, but are also expensive and fragile. Their immobilization and stabilization may reduce reaction costs, which...
-
Example of utilization of permeabilized microbial cells
PublicationThe benefits of using whole bacterial cells not only exclude expensive, laborious protein isolation and purification but also stabilize enzymes by cytosol components. Increase in activity of the cells can be achieved by cells permeabilization.
-
Expression of Deinococcus geothermalis Trehalose Synthase Gene in Escherichia coli and Its Enzymatic Properties
PublicationA novel trehalose synthase gene from Deinococcus geothermalis (DSMZ 11300) containing 1,692 bp reading-frame encoding 564 amino acids was amplified using PCR. The gene was ligated into pET30Ek/LIC vector and expressed after isopropyl alfa-D-thiogalactopyranoside induction in Escherichia coli BL21(DE3)pLysS. The recombinant trehalose synthase (DgeoTreS) containing a His6 tag at the C-terminus was purified by metal affinity chromatography...
-
Immobilized biocatalysts - useful tool for industrial processes
PublicationThe main goal of biomaterials immobilization is the industrial re-use of them for many reaction cycles. However, application of this technolgoy for full commercialization requires more experiments in this field. In this study thermostable beta-galactosidases from Ptrococcus woesei and Meiothermus ruber were taken as model proteins immobilized in alginate gel.
-
Isolation and properties of recombinant trehalose synthase
PublicationBiosynthesis of trehalose is carried out via various matabolic pathways, including the use of trehalose synthase. Bacteria of the genus Deionococcus are microorganisms which produce trehalose synthase catalizing conversion of maltose into trehalose. In this work recombinant trehalose synthase from D.radiodurans was characterized.
-
Production of trehalose in a single step enzymatic reaction
PublicationThe aim of this study was isolation and cloning of trehalose synthase gene derived from extremophilic microorganisms Deinoccoci to the expressive E. coli vectors and its biosythesis in different hosts.
-
Properties of recombinant trehalose synthase from Deinococcus radiodurans expressed in Escherichia coli
PublicationA trehalose synthase gene from Deinococcus radiodurans(DSMZ 20539)containing 1659 bp reading frame encoding 552 amino acids was amplified using PCR. The gene was finally ligated into pET30Ek/LIC vector and expressed after isopropyl β-d-thiogalactopyranoside induction in Escherichia coli (DE3) Rosetta pLysS. The recombinanttrehalose synthase (DraTreS) containing a His6-tag at the C-terminus was purified by metal affinity chromatography...
Year 2011
-
Beta-galactosidase activity of Meiothermus ruber cells
PublicationFreeze-dried cells of Meiothermus ruber catalyses cleavage of o-nitrophenyl-b-D-galactopiranoside (oNPb-gal) and conversion of lactose into glucose and galactose. The permeabilization with 2%toluene,20%ethanol and 20%acetone increased enzymatic activity from 74.87 U/g of lyophilized cells up to 129.44,114.38 and 90.19 U/g,respectively. Ethanol was an effective permeabilizing agent and its efficiency was dependent on the concentration,...
-
Biotechnologiczne przetwarzanie keratyny oraz jej wykorzystanie
PublicationW pracy przedstawiono metody przetwarzania pierza obejmujące procesy hydrolizy enzymatycznej. Uciążliwy produkt uboczny przemysłu drobiarskiego może być zastosowany do produkcji biokompozytów, biomateriałów, jako nawóz organiczny oraz pasza dla zwierząt.
-
Characterization of novel trehalose synthase from Deinococcus geothermalis.
PublicationThe method of trehalose extraction from yeast or othernatural sources is unsuitable for industrial production becauseof its low yield and high cost. Thus, the trehalose synthesizingenzyme systems that originated from a few microorganisms have been investigated.
-
Extremophile Deinococcus geothermalis as potential source of proteolytic enzymes
PublicationAmong many extremozymes, thermophilic enzymes have attracted most attention during the past four decades. Such enzymes are of considerable industrial and biotechnological interest due to the fact that the enzymes are better suited for harsh industrial processes. There are many advantages of conducting industrial processes at high temperature, such as the increased solubility of many polymeric substrates, resulting in decreased...
-
Właściwości i zastosowanie termostabilnych proteaz
PublicationProteazy stanowią największą grupę enzymów spośród dostępnych i wykorzystywanych przemysłowo biokatalizatorów. Wynika to z ważnej roli jaką odgrywają w wielu procesach technologicznych. Obecnie na rynku dostępnych jest wiele preparatów przeznaczonych głównie dla przemysłu żywnościowego, farmaceutycznego, tekstylnego,garbarniczego czy produkcji detergentów.
Year 2010
-
Characteristic and specificity of protease activity of thermophilic bacteria Meiothermus ruber
PublicationThe primary purpose of research was to establish the possibility of using thermophilic bacteria Meiothermus ruber as a source of proteolytic enzymes. The main reason of searching new proteases is their commercial value especially in production of detergents, food, pharmaceuticals, leather, diagnostics or waste management. The development of this type processes will be possible by utilization of enzymes which have unique characteristics...
-
Cloning, expression, purification and characterization of recombinant trehalose synthase from Deinococcus radiodurans.
PublicationTrehalose (α-D-glucopyranosyl-1,1-α-D-glucopyranoside) is a nonreducing disacharide in which the two glucose molecules are linked trough a α-1,1-glycosidic bond. Trehalose is readily hydrolyzed to glucose and can be used as a reserve of that sugar in the cell. The presence of trehalose was found in the cells of fungi and yeasts, bacteria, nematodes, insects, eggs, pupae and some plants. The characteristics of trehalose make it...
-
Hydrolytic and transgalactosylation activities of immobilized Escherichia coli cells transformed by β-galactosidase gene from Pyrococcus woesei
PublicationPrzedstawiono wyniki badań dotyczących skuteczności transformacji laktozy katalizowanej immobilizowanymi w żelu alginianowym rekombinantowymi komórkami Escherichia coli, transformowanymi genem b-galaktozydazy z Pyrococcus woesei. Wykazano, że aktywność hydrolityczna rekombinantowych komórek wzrasta o 35% po permeabilizacji w środowisku 40% etanolu. Optymalna temperatura i pH katalizowanej reakcji wynosiły odpowiednio 98C i 5,4....
-
Some applications of thermophiles and their enzymes for protein processing
PublicationPrzedstawiono charakterystykę, właściwości oraz możliwości zastosowań enzymów proteolitycznych wytwarzanych przez termofile. Zaletą tych biokatalizatorów jest między innymi duża odporność na działanie rozpuszczalników organicznych, detergentów i innych czynników denaturujących białka oraz mała wrażliwość na zmiany pH. Dokonano też przeglądu czynników powodujących dużą stabilność proteaz z termofili.
Year 2009
-
Activity and primary characterization of enzyme from Thermus ruber cells catalyzing conversion of maltose into trehalose
PublicationTermofilna bakteria Thermus ruber wytwarza syntazę trehalozy użyteczną do jednoetapowego przekształcania maltozy w trehalozę. Enzym ten wykazuje największą aktywność w temperaturze 65 C przy pH 6,5. Największą wydajność wytwarzania enzymu osiągano podczas hodowli drobnoustroju w temp. 55 stC w podłożu zawierającym 0,5% peptonu,0,1% ekstraktu drożdżowego oraz 0,% maltozy lub skrobi.
-
Charakterystyka bakterii rodzaju Thermus i ich przydatność w biotechnologii
PublicationGram ujemne, termofilne bakterie rodzaju Thermus o optymalnych temperaturach wzrostu mieszczących się w zakresie 55-85 C są przydatne jako źródło nukleaz, polimeraz DNA oraz wielu innych termostabilnych enzymów. W przedstawionym artykule wymieniono występowanie i morfologię bakterii rodzaju Thermus, sposoby odżywiania i warunki ich wzrostu, budowę struktur powierzchniowych, sposoby adaptacji do wzrostu w podwyższonej temperaturze...
-
Ocena przydatności bakterii Thermus ruber jako źródła termostabilnej alfa-glukozydazy użytecznej do wytwarzania syropów glukozowych
PublicationThermus ruber wytwarza alfa-glukozydazę o maksymalnej aktywności w temperaturze 65 C i przy pH 6,0. Wymieniony enzym zachowuje aktywność w zakresie pH 5,5-8,0 i prawie nie zmniejsza aktywności po 60 min inkubacji w 65 C. Szybkość hydrolizy maltozy, maltotetraozy, maltopentaozy oraz maltoheksaozy maleje wraz ze wzrostem masy cząsteckowej substratu.
-
Wykorzystanie komórek Escherichia coli transformowanych genem termostabilnej beta-galaktozydazy z Pyrococcus woesei do wytwarzania galaktozylofruktozy
PublicationKomórki rekombinantowej Escherichia coli transformowane genem beta-galaktozydazy z Pyrococcus woesei wykorzystano jako biokatalizator syntezy galaktozylofruktozy. Największą aktywność syntezy wymienionego prebiotyku (7,6 g/L x godz)uzyskano w 80C przy pH 5,4, stosując jako substrat roztwór zawierający 10% laktozy i 20% fruktozy. Aktywność transgalaktozylacji nie ulegała istotnym zmianom podczas sześciu kolejnych szarż produkcyjnych.
Year 2008
-
[Chapter] 2. Thermostable enzymes in food processing
PublicationW rozdziale przedstawiono charakterystykę termostabilnych hydrolaz glikozydów, izomeraz, transferaz,lipaz i enzymów proteolitycznych w przetwórstwie rozmaitych surowców źywnościowych. Podano przyczyny termostabilności tych enzymów oraz wymieniono korzyści wynikające z ich stosowania.
-
Charakterystyka i przydatność składników szarłatu w biotechnologii żywności
PublicationW artykule przedstawiono charakterystykę szarłatu, który jest pseudozbożem o dobrej wartości żywieniowej ze względu na zawartość lipidów o korzystnej proporcji nasyconych i nienasyconych kwasów tłuszczowych i białek o dobrym składzie aminokwasowym. Brak białek frakcji glutenu świadczy o przydatności szarłatu do wytwarzania dietetetycznej żywności przeznaczonej dla chorych na celiakię. Ze względu na małe rozmiary ziaren skrobi szarłatu...
-
Ocena przydatności bakterii Thermus ruber jako źródła syntazy trehalozy
PublicationWykazano, że termofilna bakteria Thermus ruber jest źródłem syntazy trehalozy,katalizującej wewnątrzcząsteczkową transglikozylację maltozy. Wymieniony enzym przejawia największą aktywność w temp. 65 st. C przy pH 6,5. Najlepszą wydajność syntazy trehalozy uzyskiwano podczas hodowli bakterii w 55 st. C na podłożu zawierającym 0,5% peptonu 0,1% wyciągu drożdżowego i 0,5% maltozy lub skrobi.
Year 2007
-
Otrzymywanie i niektóre zastosowania unieruchomionych enzymów
PublicationWyjaśniono, dlaczego immobilizacja enzymów ma duże znaczenie w przemyśle. W artykule przedstawiono sposoby immobilizacji enzymów, jak też rodzaje i właściwości stosowanych nośników. Podano także charakterystykę rozmaitych preparatów unieruchomionych enzymów, przyczyny zmian właściwości biokatalizatorów spowodowane immibilizacją oraz określono najważniejsze zastosowania wymienionych preparatów.
-
Protective effect of lysostaphin from Staphylococcus simulans against growth of Staphylococcus aureus in milk and some other food products
PublicationZbadano skuteczność hamowania rozwoju Staphylococcus aureus w mleku, mięsie wieprzowym i majonezie lizostafyną uzyskaną przez ekspresję genu enzymu ze Staphylococcus simulans w komórkach Escherichia coli. Przeprowadzone eksperymenty wykazały znaczący wpływ lizostafyny na ograniczenie rozwoju Staphylococcus aureus.
-
Rozdział 7. Metody oznaczania i badania białek w żywności
PublicationPrzedstawiono metody frakcjonowania białek żywności, oznaczania ich składu aminokwasowego i oddzielania niebiałkowych związków azotowych. Określono przydatność rozmaitych technik chromatograficznych i elektroforetycznych do rozdzielania białek i podano zasady oznaczania zawartości białek metodą Kjeldahla, biuretową, Lowryego, Bradforda i z wykorzystaniem absorbcji w nadfiolecie. Scharakteryzowano przydatność metod immunometrycznych.
-
Składniki mineralne
PublicationPodano zawartość składników mineralnych w rozmaitych surowcach i produktach żywnościowych oraz przedstawiono niektóre sposoby ich oznaczania. Omówiono także wpływ składników mineralnych na kształtowanie cech jakościowych podczas wytwarzania i przechowywania żywności.
Year 2006
-
Immobilization of thermostable beta glucosidase from Sulfolobus shibatae by cross-linking with transglutaminase
PublicationOpracowano metodę immobilizacji termostabilnej beta-glukozydazy przez katalizowane transglutaminazą sieciowanie na nośniku krzemionkowym. Aktywność uzyskanego preparatu wynosi 3883 U/g nośnika. Największą wydajność unieruchamiania uzyskano w temperaturze 50C, przy pH 5,0. Immobilizacja prawie nie zmieniała optymalnego pH działania enzymu, który uzyskiwał największą aktywność w temperaturze 98C. Badania w reaktorze kolumnowym wykazały...
-
Production of trehalose by intramolecular transglucosylation of maltose catalysed by a new enzyme from Thermus thermophilus hb-8
PublicationThermus thermophilus HB-8 jest źródłem syntazy trehalozy katalizującej konwersję maltozy. Aktywność specyficzna wytwarzania trehalozy w reakcji katalizowanej ekstraktem białek komórkowych wymienionej bakterii wynosi 0,1 U/mg białka i frakcjonowanie białek przez wysalanie siarczanem amonu powoduje około 3,5-krotne zwiększenie aktywności specyficznej. Optymalna temperatura konwersji maltozy wynosi 65 st.C i w 85 st.C zostaje zachowane...
-
Sources, properties and suitability of new thermostable enzymes in food processing
PublicationW niniejszym artykule przedstawiono przegląd badań wskazujących na przydatność rekombinantowej alfa-amylazy z Pyrococcus woesei i alfa glukozydazy z Thermus thermohilus do jednoetapowego wytwarzania syropów skrobiowych. Rekombinantowa beta-glikozydaza z Pyrococcus woesei może być natomiast stosowana do produkcji bezlaktozowych produktów z mleka i serwatki. Zachowanie aktywności w szerokim zakre-sie pH od 4,3 do 6,6 oraz duża termostabilność...
Year 2005
-
Funkcje fizjologiczne i możliwości zastosowań trehalozy
PublicationTrehaloza jest disacharydem naturalnego pochodzenia zbudowanym z dwóch reszt glukozy połączonych wiązaniem 1,1 glikozydowym. Cukier ten charakteryzuje się dużą zdolnością do stabilizowania białek i membran biologicznych podczas zamrażania i odwadniania komórek i w związku z tym zabezpiecza je przed niekorzystnym oddziaływaniem środowiska. Stwarza to także omówione w artykule duże możliwości zastosowania trehalozy w medycynie,...
-
Unieruchamianie rekombinowanej beta-galaktozydazy w reakcjach katalizowanych transglutaminazą
PublicationTermostabilną beta-galaktozydazę wyizolowaną z Escherichia coli zawierającej gen enzymu z Pyrococcus woesei, sieciowano transgluta-minazą na żelu krzemionkowym. Otrzymany preparat wykazuje w 70 st.C aktywność hydrolizy ONPG wynoszącą 11,573 U/g nośnika. Optymalne pH i temperatura działania enzymu wynosi odpowiednio 5,5 oraz 95 st.C. Preparat unieruchomionego enzymu zachowuje około 70 % początkowej aktywności po 1 godzinie inkubacji...
-
Źródła, otrzymywanie i przydatność niektórych termostabilnych enzymów w przetwórstwie skrobi i mleka
PublicationPrezentowane wyniki wskazują na możliwość usprawnienia produkcji syropów skrobiowych przez zastosowanie rekombinantowej alfa-amylazy z Pyrococcus woesei i termostabilnej alfa-glukozydazy z Thermus thermophilus. Wykazano także przydatność rekombinantowej, termosta-bilnej beta-galaktozydazy z Pyrococcus woesei do wytwarzania bez-laktozowego mleka i serwatki. Enzym ten wykazuje dużą termostabil-ność i znaczną aktywność w szerokim...
Year 2004
-
Aktywność amylolityczna ciałek inkluzyjnych izolowanych z Escherichia coli BL21(DE3)pLysS transformowanej plazmidem pTYB2alfa-Amyl.
PublicationBadania ekspresji rekombinantowej alfa-amylazy izolowanej z Escherichia coli BL21(DE3)pLysS transformowanej plazmidem pTYB2alfa-Amyl wykazały, że około 49 % wytwarzanego enzymu występuje w postaci ciałek inkluzyjnych. Źródłem genu termostabilnej alfa-amylazy był szczep Pyrococcus woesei (DSM 3773). W celu uzyskania aktywnych białek z ciałek inkluzyjnych odwirowane komórki bakterii inkubowano w roztworze CaCl2 i po trawieniu lizozymem...
-
Cloning of the thermostable alpha-amylase gene from Pyrococcus woesei in Escherichia coli.
PublicationGen kodujący alfa-amylazę z Pyrococcus woesei klonowano do plazmidów pET21d(+)lub pYTB2, którymi transformowano komórki Escherichia coli. Otrzymana rekombinantowa alfa amylaza wykazuje maksymalną aktywność przy pH 5.6 w temperaturze 95 stC i przejawia około 24 % początkowej aktywności nawet po 2 godz. inkubacji w 120 stC. Duża termostabilność otrzymanego preparatu świadczy o jego przydatności do enzymatycznego upłynniania skrobi.
-
Thermostable beta-glucosidase with a broad substrate specifity suitable for processing of lactose-containing products.
PublicationHipertermofilny archeon Sulfolobus shibatae wytwarza termostabilną beta glukozydazę przydatną do hydrolizy laktozy w mleku i serwatce przejawiającą największą aktywność w 85 stC przy pH 5,5. Aktywność ekstraktu bezkomórkowego Sulfolobus shibatae wynosi 0.29 U/mg białka i może być 17-krotnie zwiększona poprzez frakcjonowanie siarczanem amonu, chromatografię jonowymienną i filtrację żelową. Badany enzym ma dużą termostabilność i...
Year 2003
-
Charakterystyka preparatów beta- galaktozydazy z Sulfolobus shibatae.
PublicationCelem pracy było zbadanie przydatności cytoplazamatycznej beta- galaktozydazy/beta- glukozydazy z hipertermofilnego archeona Sulfolobus shibatae do hydrolizy laktozy. 16-krotny stopień oczyszczenia ekstraktu bezkomórkowego,zapewniający aktywność specyficzną 29,5 U/mg białka uzyskiwano poprzez frakcjonowanie siarczanem amonu, chromatografię jonowymienną i sączenie molekularne. Otrzymany preparat wykazywał największą aktywność...
-
Niektóre przyczyny unikatowej oporności cieplnej hipertermofili
PublicationWyjątkowa odporność cieplna hipertermofili stanowiących dogodne źródło termostabilnych enzymów wynika z niewielkich zmian budowy cząsteczek białek i kwasów nukleinowych oraz modyfikacji błon biologicznych. Przeżycie komórek hipertermofili w podwyższonych temperaturach umożliwia także synteza białek szoku cieplnego i rozmaitych substancji stabilizujących cząsteczki oraz szybka resynteza szczególnie termostabilnych intermediatów...
Year 2002
-
Isolation and some properties of the thermostable beta-galactosidase of Pyrococcus woesei expressed in Escherichia coli
PublicationOpracowano metodę izolowania oraz zbadano właściwości enzymu otrzymanego ze szczepu Escherichia coli zawierającego gen kodujący termostabilną beta-ga-laktozydazę z Pyrococcus woesei.
-
New source of the thermostable alpha-glucosidase suitable for single stepstarch processing
PublicationZbadana wewnątrzkomórkowa termostabilna alfa-glukozydaza z Thermus thermo-philus przejawia największą aktywność w 85 C przy pH 6.2. Aktywność enzymu po 5 h inkubacji w 75 C (pH 6.2) prawie nie ulega zmianie a okres połowicznej inaktywacji w 85 C wynosi 2 h. Właściwości te wskazują na przydatność wymienionego enzymu w jednoetapowej hydrolizie skrobi.
-
Składniki mineralne
PublicationOmówiono znaczenie i zawartość składników mineralnych w surowcach i produk-tach żywnościowych. Określono ich wpływ na jakość wyrobów oraz podano najwa-żniejsze sposoby ich oznaczania.
-
Termofile jako żródło alfa-glukozydaz użytecznych w produkcji syropów glukozowych
PublicationOkreślono różnice optymalnych warunków działania alfa-glukozydaz z różnych mikroorganizmów. Stwierdzono, że niektóre alfa-glukozydazy wyizolowane z ekstremalnych termofili zachowują aktywność w temperaturze około 100 C i są przydatne do wytwarzania syropów glukozowych.
seen 1334 times