Filters
total: 121
filtered: 89
Search results for: PRZEESTRYFIKOWANIE ENZYMATYCZNE
-
Esteraza GDSL z psychrotolerancyjnego szczepu Pseudomonas sp. S9 - konstrukcja systemów ekspresyjnych opartych o komórki Escherichia coli i Pichia pastoris, produkcja, oczyszczanie i charakterystyka uzyskanych białek rekombinowanych
PublicationW rozprawie doktorskiej celu opracowania wydajnej metody produkcji rekombinantowych wariantów sekwencyjnych enzymu esterolitycznego z psychrotolerancyjnego szczepu Pseudomonas sp. S9 zaprojektowano układy ekspresyjne umożliwiające ich produkcję w bakteriach Escherichia coli oraz drożdżach Pichia pastoris. W systemie ekspresyjnym E. coli wyprodukowano dwa warianty białek: EstS9Auto (białko zbudowane z domeny katalitycznej, domeny...
-
The influence of hydrophobic substances on water vapor permeability of fish gelatin films modified with transglutaminase or 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC)
PublicationFolie z niemodyfikowanej, a także usieciowanej enzymatycznie (transglutaminazą) lub chemicznie (EDC) żelatyny rybnej wykazują nadmierną przepuszczalność pary wodnej. Polepszenie właściwości barierowych w stosunku do wody uzyskano poprzez wprowadzenie w struktury folii substancji hydrofobowych. Dodatek oleju z amarantusa lub wosku pszczelego spowodował zmniejszenie WVP folii o ok. 20-90% w zależności od stężenia tych substancji...
-
The role of cytochrome P450 reductase (CPR) in metabolism of potent nitroacridine antitumor, C-1748
PublicationCelem pracy było poznanie molekularnego mechanizmu działania pochodnych 9-amino-1-nitroakrydyny. Zbadano przemiany enzymatyczne tych związków w różnych układach enzymatycznych: I. Szczurza frakcja mikrosomalna z reduktazą cytochromu P450. II. Rekombinantowe izoenzymy cytochromu P450 z wysokim i niskim poziomem reduktazy cytochromu P450. III. Frakcje mikrosomalne dzikiego typu oraz pozbawione genu kodującego reduktazę cytochromu...
-
Białka aktywne biologicznie obecne w soku pokrochmalnianym
PublicationPodczas przetwarzania 1 tony ziemniaków na skrobię powstaje od 5 do 12 m3 odpadów ciekłych, które zawierają 300-410 g białek na 1 kg suchej masy. Trzy główne grupy białek to: białka typu patatyny, inhibitory proteaz o charakterze zasadowym, grupa białek złożonych o wielkości 22 kDa. Białka te mogą zostać wyizolowane z soku pokrochmalnianego w formie natywnej, a następnie wykorzystane jako: środki ochrony roślin, dodatki do żywności...
-
The role of proteins in food. Chapter 6
PublicationStruktura i konformacja wpływają na biologiczne oraz funkcjonalne właściwości białek i na ich rolę w tworzeniu pożądanych cech produktów żywnościowych. Właściwości funkcjonalne to rozpuszczalność w środowisku wodnym o różnej sile jonowej, wodochłonność oraz zdolność żelowania, tworzenia błon, emulgowania lipidów i pienienia się. Białka mięsa, ryb, mleka, jaj, nasion roślin strączkowych, nasion zbóż oraz drobnoustrojów różnią się...
-
Biofumigacja jako przyjazna środowisku technologia ochrony roślin
PublicationWobec rosnącej świadomości co do szkodliwości syntetycznych pestycydów, biofumigacja może stanowić alternatywną metodykę ochrony roślin. Proces ten polega na wykorzystaniu naturalnych związków antybiologicznych, zawartych m.in. w roślinach z rodziny kapustowatych, do zwalczania agrofagów. Do oceny skuteczności tej przyjaznej środowisku technologii ochrony roślin niezbędna jest znajomość metodyk oznaczania aktywności enzymatycznej...
-
Composite Bioelectrodes Based on Lipidic Cubic Phase with Carbon Nanotube Network
PublicationElektrody z węgla szklistego modyfikowane fazą kubiczną z siecią nanorurek zastosowano do enzymatycznej redukcji tlenu katalizowanej przez lakazę. Zastosowanie nanorurek obniżyło nadpotencjał redukcji tlenu o 0,5 V. W celu zwiększenia gęstości prądu redukcji tlenu zastosowano znany mediator przeniesienia elektronów - ABTS. Mediator adsorbowano na nanorurkach lub wiązano kowalencyjnie z końcami nanorurek. Kowalencyjne związanie...
-
Glucose/O2 biofuel cell to generate electricity
PublicationOgniwa paliwowe mogą stanowić jedną z głównych technologii do produkowania energii w przyszłości. Pozwalają na uzyskanie energii elektrycznej i ciepła bezpośrednio z zachodzącej w nich reakcji chemicznej. Glukoza utleniana jest do glukonolaktonu przez enzym Glucose Oxidase, który jest immobilizowany ze specyficznym mediatorem na anodzie, podczas gdy tlen jest redukowany do wody za pomocą enzymu Laccase zimmobilizowanego ze specyficznym...
-
Metabolic transformation of antitumor agent C1311 with various fractions of rat liver.
PublicationWykazano, że enzymatyczna aktywacja jest konieczna dla aktywności bilogicznej pochodnej C-1311. Zbadano przemiany związku w obecności różnych frakcji enzymatycznych mikrosomalnych komórek wątroby szczura.Badania te wykazały, że związek C-1311 jest bardziej podatny na transformację pod wpływem frakcji aktywowanych enzymów mikrosomalnych (CYP1A, CYP2B, CYP3A i CYP4A) niż frakcji S9, cytozolowej czy mikrosomów nieaktywowanych. Związek...
-
Cloning of the thermostable alpha-amylase gene from Pyrococcus woesei in Escherichia coli.
PublicationGen kodujący alfa-amylazę z Pyrococcus woesei klonowano do plazmidów pET21d(+)lub pYTB2, którymi transformowano komórki Escherichia coli. Otrzymana rekombinantowa alfa amylaza wykazuje maksymalną aktywność przy pH 5.6 w temperaturze 95 stC i przejawia około 24 % początkowej aktywności nawet po 2 godz. inkubacji w 120 stC. Duża termostabilność otrzymanego preparatu świadczy o jego przydatności do enzymatycznego upłynniania skrobi.
-
Materiały biozgodne i specjalnego przeznaczenia
PublicationW książce przedstawiono ogólną charakterystykę materiałów używanych w medycynie i laboratoriach klinicznych. Opisano wyjaławianie materiałów medycznych; mteriały okulistyczne, soczewki kontaktowe, szkła okularowe, enzymatyczne oczyszczanie soczewek kontaktowych, płyny, krople i maści do oczu; materiały dentystyczne: wiertła, pasty szlifierskie, wypełnienia; materiały na implanty metalowe, ceramiczne, z tworzyw sztucznych; cementy...
-
Rodniki, utleniacze i przeciwutleniacze
PublicationLiczne procesy chemiczne, enzymatyczne i mikrobiologiczne, zachodzące podczas przechowywania i przetwarzania, mają wpływ na kształtowanie jakości żywności. Istotne znaczenie ma utlenianie przy udziale wolnych rodników i reaktywnych form tlenu (RFT). Zmiany powodowane utlenianiem m.in. pogarszają sensoryczne właściwości i wartość odżywczą żywności oraz mogą wywoływać zagrożenia zdrowotne wynikające ze szkodliwości niektórych produktów...
-
Effect of transglutaminase and EDC on biodegradation of fish gelatin and gelatin-chitosan films
PublicationCelem pracy było zbadanie podatności usieciowanych folii opakowaniowych z naturalnych polimerów na enzymatyczną hydrolizę. Niemodyfikowane folie żelatynowe były całkowicie hydrolizowane przez pepsynę i proteinazę N oraz w 60% przez pepsynę. Sieciowania przy użyciu transglutaminazy lub EDC zmiejszyło podatność folii na hydrolizę tylko przez pepsynę. Obecność chitozanu w dwuskładnikowych foliach modyfkownych EDC zmniejszyła stopień...
-
N-alkyl derivatives of 2-amino-2-deoxy-D-glucose
PublicationMono- i di-N-alkilowe pochodne 1,3,4,6-tetra-O-acetylo-2-amino-2-deoksy-beta-D-glukozy (alkil = metyl, etyl, propyl, butyl, pentyl, heksyl, benzyl) otrzymano w wyniku redukcyjnej alkilacji per-O-acetylo-D-glukozaminy. (N-etylo, N-propylo, N-butylo, N-pentylo, N-heksylo)-1,3,4,6-tetra-O-acetylo-2-amino-2-deoksy-beta-D-glukozy deacetylowano w celu podjęcia prób enzymatycznej fosforylacji. Wszystkie produkty scharakteryzowano za pomocą...
-
Badanie lipolizy ogrzewanego oleju rzepakowego i wyizolowanej z niego frakcji niepolarnej
PublicationPorównano przebieg hydrolizy (lipolizy) oleju rzepakowego nieogrzewanego, ogrzewanego (240oC, 4h) i wyizolowanej z niego frakcji niepolarnej. Reakcję hydrolizy prowadzono w obecności lipazy trzustkowej w czasie 3, 5 i 10 min., stosując metodę Brockerhoffa. Produkty lipolizy rozdzielano metodą preparatywnej CCW, oznaczano ich skład procentowy oraz skład kwasów tłuszczowych triacylogliceroli, które nie uległy hydrolizie. Stwierdzono,...
-
Flavin monooxygenases, FMO1 and FMO3, not cytochrome p450 isoenzymes, contribute to metabolism of anti-tumour triazoloacridinone, C-1305, in liver microsomes and HepG2 cells.
PublicationCelem pracy było określenie roli wybranych enzymów frakcji mikrosomalnej komórek wątroby w metabolizmie pochodnej triazoloakrydonu, związku C-1305. Wykazano, że badana pochodna ulega transformacji wobec frakcji enzymów izolowanych z hepatocytów szczurzych i ludzkich oraz jest metabolizowana przez komórki linii HepG2. Badania wykazały ponadto, że enzymami odpowiedzialnymi za obserwowane przemiany były monooksygenazy flawinowe, FMO1...
-
Carbon nanotubes chemically derivatized with rebox systems as mediators for biofuel cell applications
PublicationEnzymatyczne bioogniwa paliwowe to urządzenia wykorzystujące enzymy do przemiany energii chemicznej w elektryczną. Zyskana w ten sposób energia może służyć do zasilania wszczepialnych urządzeń (np. czujników glukozy, rozruszników serca).Przedstawiono sposób otrzymywania i właściwości bioelektrod, w których wykorzystano nanorurki węglowe modyfikowane mediatorami enzymatycznych reakcji redoks. Do nanorurek przyłączano zarówno mediatory...
-
Cloning, expression, and purification of a recombinant cold-adapted β-galactosidase from antarctic bacterium Pseudoalteromonas sp. 22b
PublicationAntarktyczny szczep, gram-ujemnych bakterii Pseudoalteromonas sp. 22b, wyizolowanych z przewodu pokarmowego kryla z gatunku Thyssanoessa macrura, jest producentem wewnątrzkomórkowej zimnolubnej beta-galaktozydazy. Białko to jest homotetramerem, w którym każda z jednostek monomeru zbudowana jest z 1028 reszt aminokwasowych. Gen kodujący ten enzym został sklonowany i eksprymowany w komórkach E. coli. Następnie z zastosowaniem procedury...
-
Carbon Nanotubes Chemically Derivatize with Redox Systems as Mediators for Biofel Cell Applicatoions
PublicationEnzymatyczne bioogniwa paliwowe to urządzenia wykorzystujące enzymy do przemiany energii chemicznej w elektryczną. Zyskana w ten sposób energia może służyć do zasilania wszczepialnych urządzeń (np. czujników glukozy, rozruszników serca).Przedstawiono sposób otrzymywania i właściwości bioelektrod, w których wykorzystano nanorurki węglowe modyfikowane mediatorami enzymatycznych reakcji redoks. Do nanorurek przyłączano zarówno mediatory...
-
Carbon Nanotubes Chemically Derivatized with Redox Systems as Mediators for Biofuel Cell Applications
PublicationEnzymatyczne bioogniwa paliwowe to urządzenia wykorzystujące enzymy do przemiany energii chemicznej w elektryczną. Zyskana w ten sposób energia może służyć do zasilania wszczepialnych urządzeń (np. czujników glukozy, rozruszników serca). Przedstawiono sposób otrzymywania i właściwości bioelektrod, w których wykorzystano nanorurki węglowe modyfikowane mediatorami enzymatycznych reakcji redoks. Do nanorurek przyłączano zarówno mediatory...
-
Functional domains of Candida albicans glucosamine-6-phosphate synthase.
PublicationSkonstruowano oddzielnie dwie domeny syntazy GlcN-6-P z Candida albicans jako białka fuzyjne, tj. domenę glutaminazową oraz domenę izomerazową, zawierające sekwencje poliHis, odpowiednio na C- i N-końcu. Zoptymalizowano warunki nadekspresji domen w komórkach Escherichia coli. Oba białka oczyszczono do homogenności przy zastosowaniu chromatografii metalopowinowactwa oraz zbadano ich podstawowe właściwości. Wyznaczono parametry kinetyczne...
-
Analiza składu fazy gazowej wytwarzanej podczas fermentacji ciemnej
PublicationFermentacja ciemna umożliwia otrzymywanie bio-wodoru z substratów pochodzenia biologicznego, np. z biomasy ligno-celulozowej. Kontrola i właściwe sterowanie przebiegiem procesu fermentacji ciemnej wymaga bieżącego monitoringu składu powstającej fazy gazowej. W niniejszej pracy przedstawiono metodykę analizy składu fazy gazowej z wykorzystaniem techniki GC-TCD-FID. Zaproponowana metodyka umożliwia oznaczenie następujących gazów...
-
The Imidazoacridinone Antitumor Drug, C-1311, Is Metabolized by Flavin Monooxygenases but Not by Cytochrome P450s.
PublicationPrezentowane w publikacji wyniki badań mają na celu wyjaśnienie roli enzymów wątrobowych w metabolizmie przeciwnowotworowych pochodnych C-1311 oraz C-1330. Oba związki inkubowane były z frakcją mikrosomalną oraz enzymami rekombinantowymi należącymi do grypy cytochromu P450, FMO oraz UGT. Badania wykazały, że oba związki są metabolizowane przez enzymy frakcji mikrosomalnej, ale nie przez enzymy cytochromu P450. Aktywność enzymatyczna...
-
The crystal and solution studies of glucosamine-6-phosphate synthase from Candida albicans
PublicationOkreślono strukturę krystaliczną domeny izomerazowej syntazy glukozamino-6-fosforanu z Candida albicans w stanie natywnym, oraz w kompleksie z inhibitorem allosterycznym UDP-GlcNAc, fruktozo-6-P, glukozo-6-P oraz analogiem stanu przejściowego reakcji enzymatycznej - 2-amino-2-deoksy-D-mannitolo-6-P (ADMP). Na podstawie wyników badań metodą niskokątowego rozpraszania promieni X (SAXS) wydedukowano przypuszczalną strukturę kompletnej...
-
Rola rodników, utleniaczy i przeciwutleniaczy w żywności
PublicationLiczne procesy, chemiczne, enzymatyczne i mikrobiologiczne zachodzące podczas przechowywania i przetwarzania, mają wpływ na kształtowanie jakości żywności. Istotne znaczenie ma utlenianie przy udziale wolnych rodników i reaktywnych form tlenu (RFT). Zmiany powodowane utlenianiem m.in. pogarszają sensoryczne właściwości i wartość odżywczą żywności oraz mogą wywoływać zagrożenia zdrowotne wynikające ze szkodliwości niektórych produktów...
-
Różnicowanie C. albicans i C. dubliniensis w oparciu o polimorfizm genu syntazy homocytrynianowej z wykorzystaniem metody PCR RFLP
PublicationNajczęstszym czynnikiem etiologicznym zakażeń wywołanych przez drożdżaki z rodzaju Candida jest C. albicans. Gatunek ten posiada bardzo zbliżone cechy fenotypowe do C. dubliniensis co często wiąże się z błędną identyfikacją. Skutkuje to wtórnym zakażeniem wywołanym przez współwystepujący gatunek C. dubliniensis, który nabywa oporność na flikonazol stosowany w terapii C. albicans. Celem badań była konstrukcja układu diagnostycznego...
-
Zaufanie w detalicznych transakcjach internetowych
PublicationAutor wprowadza rozróżnienie pomiędzy zaufaniem w relacji interpersonalnej (RI) i nieinterpersonalnej (RN). Odwołując się do analizy Dylematu Więźnia w teorii gier i przywołując teorię kooperacji B. Williamsa, autor pokazuje, że logiczna struktura zaufania powinna zostać uzupełniona przez nieegoistyczne mikro-motywacje. W detalicznym handlu elektronicznym istnieją dwie przeciwstawne tendencje: człowiek i technika. Technologia powoduje...
-
Determination of glucosinolates and their decomposition products-indoles and isothiocyanates in cruciferous vegetables
PublicationWyniki badań epidemiologicznych oraz wyniki doświadczeń prowadzonych na zwierzętach mogą być podstawą do tezy, że wysoki poziom spożycia warzyw z rodziny krzyżowych, takich jak brokuły, brukselka, kalafior, kapusta może chronić organizm ludzki przed rozwojem nowotworów. W związku z tym, wspomniane warzywa wzbudzają zainteresowanie badaczy jako potencjalne źródło substancji mogących znaleźć zastosowanie w profilaktyce chorób nowotworowych....
-
3-monochloro-1,2-propandiol w produktach żywnościowych
Publication3-monochloro-1,2-propandiol (3-MCPD) jest związkiem należącym do grupy zanieczyszczeń żywności zwanych chloropropanolami. Powstaje on w produktach żywnościowych poddanych działaniu podwyższonej temperatury. Po raz pierwszy jako zanieczyszczenie żywności został zidentyfikowany w 1978 roku w roślinnych hydrolizatach białkowych i produktach pochodnych takich jak sosy sojowe. Później jego obecność wykryto w wielu popularnych produktach...
-
Badanie przepuszczalności jelitowej - nowatorskie narzędzie diagnozy wielu chorób
PublicationPrzepuszczalność jelitowa jest przedmiotem badań od ponad dwóch dekad. Zbadano wpływ wielu chorób i schorzeń na działanie układu pokarmowego. Układ pokarmowy jest skomplikowanym systemem połączonych ze sobą narządów i spełnia różnorodne funkcje. Jedną z nich jest wchłanianie substancji odżywczych i wody z jelita cienkiego. Można wyróżnić dwie drogi, którymi są wchłanianie substancje odżywcze i woda: przez błonę komórkową i między...
-
Charakterystyka produktów utleniania fosfolipidów oraz określenie ich wybranych aktywności biologicznych w komórkach HT29 jako modelu ludzkiego przewodu pokarmowego
PublicationWyniki licznych badań epidemiologicznych wskazują, że rodzaj, ilość oraz jakość dostarczanych wraz z pożywieniem lipidów może przyczyniać się do ograniczenia bądź rozwoju chorób dietozależnych, takich jak otyłość, cukrzyca typu 2, miażdżyca czy nadciśnienie tętnicze. Rosnące zainteresowanie określeniem wpływu lipidów dostarczanych z pożywieniem na funkcjonowanie ludzkiego organizmu wymaga przeprowadzenia licznych badań, zarówno...
-
Rola polimorfizmu i zróżnicowanej ekspresji genów cytochromu P450 w metabolizmie ksenobiotyków.
PublicationZdolność do metabolizmu ksenobiotyków przez cytochromy P450 (CYP) określona jest przez polimorfizm i poziom ekspresji genów tych białek. Najwięcej, 40 odmian polimorficznych o zróżnicowanej aktywności enzymatycznej, poznano dla CYP2D6, natomiast tylko dwie w przypadku CYP2C9, których obecność powoduje zahamowanie metabolizmu wielu leków. Z kolei polimorfizm genu CYP3A4 nie miał istotnego wpływu na aktywność metaboliczną jego produktu...
-
The influence of different acids and pepsin on the extractability of collagen from the skin of Baltic cod (Gadus morhua)
PublicationZastosowano 5,0 M roztwory kwasu cytrynowego, mlekowego, octowego oraz 0,115 M roztwór kwasu solnego. Kolagen z całych skór ekstrahowano w 4 st.C odpowiednimi kwasami (1 : 6, w/v) w czasie 24, 48 i 72 h. Stwierdzono, że kwas solny jest najmniej efektywnym rozpuszczalnikiem kolagenu spośród użytych kwasów. W zastosowanych warunkach doświadczeń maksymalnie można wyekstrahować kwasem cytrynowym 60 % kolagenu, kwasem octowym i mlekowym...
-
Analiza kondensatów oddechowych - wyzwanie dla analityków
PublicationOd lat 90-tych XX wieku coraz szerszym zainteresowaniem, zarówno w środowisku medycznym jak i analitycznym, cieszą się metody nieinwazyjne polegające na badaniu indukowanej plwociny, kondensatu oddechowego oraz na pomiarze składu powietrza wydychanego. Kondensaty oddechowe zawierają wszystkie substancje, jakie występują w płynie wyściełającym układ oddechowy. Ze względu na stosunkowo prosty skład matrycy są one idealnymi próbkami...
-
Fotometryczny czujnik glukozy oparty na enzymatycznych paskach testowych
PublicationCukrzyca jest chorobą dotykającą co roku na całym świecie około 3 mln ludzi [1]. Brak możliwości wyleczenia choroby generuje koszty związane z jej monitorowaniem. W USA corocznie wydaje się na ten cel 174 mld dolarów [2]. Stężenie glukozy we krwi zdrowego człowieka na czczo waha się od 80 mg/dl do 110 mg/dl [3]. Stan organizmu z niedoborem glukozy nazywany jest hipoglikemią, a stan podwyższonej zawartości cukru – hiperglikemią...
-
The antitumor derivatives, C1305 and C1748, were different in effects on CYP3A4 expression and catalytic activity in HepG2 cells
PublicationCytochromy P450 (CYP) należą do grupy enzymów biorących udział w 70-80% metabolizmu fazy I większości stosowanych klinicznie leków. Z tego powodu oddziaływanie leków z enzymami cytochromu P450 stało się istotnym elementem w projektowaniu chemoterapeutyków, szczególnie tych, które są stosowane w terapii wielolekowej. Znajomość substratów, induktorów i inhibitorów poszczególnych izoenzymów P450, nie tylko może obniżać częstość występowania...
-
Aktywność amylolityczna ciałek inkluzyjnych izolowanych z Escherichia coli BL21(DE3)pLysS transformowanej plazmidem pTYB2alfa-Amyl.
PublicationBadania ekspresji rekombinantowej alfa-amylazy izolowanej z Escherichia coli BL21(DE3)pLysS transformowanej plazmidem pTYB2alfa-Amyl wykazały, że około 49 % wytwarzanego enzymu występuje w postaci ciałek inkluzyjnych. Źródłem genu termostabilnej alfa-amylazy był szczep Pyrococcus woesei (DSM 3773). W celu uzyskania aktywnych białek z ciałek inkluzyjnych odwirowane komórki bakterii inkubowano w roztworze CaCl2 i po trawieniu lizozymem...
-
The antitumor derivative, C-1748, affects CYP3A4: crosstalk between drug metabolism, CYP3A4 expression and enzymatic activity
PublicationJedną z głównych przeszkód w przewidywaniu wyników terapii u pacjentów z nowotworem jest indywidualny przebieg metabolizmu stosowanych leków wynikający z polimorfizmu genów enzymów metabolizujących, jak również duża zmienność farmakokinetyki leków obserwowana u różnych pacjentów podczas trwania chemioterapii. Z powodu tzw. ''wąskiego okna terapeutycznego'' występującego w przypadku terapii lekami przeciwnowotworowymi, małe zmiany...
-
Genetycznie modyfikowane mikroorganizmy narzędziem służącym do usuwania metali ciężkich ze środowiska
PublicationMetale ciężkie są pierwiastkami metalicznymi i półmetalicznymi o gęstości powyżej 4,5 g•cm-3. Powodują zaburzenia w strukturze DNA, mogą być przyczyną chorób nowotworowych, układu nerwowego, pokarmowego, naczyniowego i kostnego. Wykorzystywane są w przemyśle chemicznym, elektromaszynowym, szklarskim, metalurgicznym, farbiarskim, wydobywczym, energetyce jądrowej. Wiele metali, takich jak kobalt, miedź, nikiel, stanowi mikroelementy...