Filters
total: 660
-
Catalog
Search results for: REKOMBINANTOWE ENZYMY
-
The ability of new sugar-modified derivatives of antitumour anthracycline, daunorubicin, to stimulate NAD(P)H Oxidation in Different Cellular Oxidoreductase Systems: NADH Dehydrogenase, NADPH Cytochrome P450 Reductase, and Xanthine Oxidase.
PublicationUboczne działanie cytostatyków z grupy antracyklin prowadzi do uszkodzenia serca (kardiotoksyczność) w wyniku pośredniczenia przez te związki przeniesienia jednoelektronowego ze zredukowanych nukleotydów do tlenu i powstania reaktywnych anionorodników tlenowych. Proces ten jest katalizowany głównie przez trzy enzymy: dehydrogenazę NADH, reduktazę NADPH/cytochrom P450 oraz oksydazę ksantynową. W publikacji przedstawione są wyniki...
-
A cold-adapted esterase from psychrotrophic Pseudoalteromonas sp. strain 643A
PublicationDzięki zastosowaniu lipaz możliwa jest biotechnologiczna produkcja m.in. biodegradowalnych biopolimerów, biopaliw (tzw. biodiesel), wielu terapeutyków, herbicydów, pestycydów, kosmetyków, substancji smakowych, serów i in. Szczególnie interesującą grupę stanowią enzymy lipolityczne, pochodzące z organizmów psychrofilnych i psychrotrofowych, ze względu na zdolność do wydajnego katalizowania reakcji w temperaturach rzędu 10-20 ºC....
-
Harman and norharman, metabolites of entomopathogenic fungus Conidiobolus coronatus (Entomopthorales), disorganize development of Galleria mellonella (Lepidoptera) and affect serotonin-regulating enzymes
Publication -
Siderofory bakteryjne – rola w patogenezie i potencjał wykorzystania w diagnostyce
PublicationDo prawidłowego funkcjonowania i wzrostu organizmów żywych zarówno ludzi, jak i bakterii niezbędne jest żelazo. Mikroelement ten występuje na dwóch różnych stopniach utlenienia: jako jon żelazawy (Fe2+) rozpuszczalny w roztworach fizjolo-gicznych oraz jako jon żelazowy (Fe3+), który nie tworzy roztworów wodnych [1]. Dzięki swoim właściwościom oksydo-redukcyjnym, żelazo wpływa na poprawne funkcjonowanie bardzo licznej grupy enzymów,...
-
C-1305 inactivation of recombinant human cytochrome P450, CYP1A2 and CYP3A4, is due to mechanism-based inhibition
PublicationPodjęto próbę określenia mechanizmu obserwowanej inhibicji izoenzymów CYP1A2 i CYP3A4 przez pochodną triazoloakrydonu C-1305.W pierwszym kroku stwierdzono, że hamowanie aktywnosci obu enzymów jest procesem nieodwracalnym. W kolejnych etapach badań wykazano między innymi, że obecność NADPH zwiększa istotnie stopień obserwowanej inhibicji, co wskazało, że mamy do czynienia z inhibicją samobójczą opartą na mechanizmie działania (ang....
-
In vitro enzyme kinetics and NMR-based product elucidation for glutathione S-conjugation of the anticancer unsymmetrical bisacridine C-2028 in liver microsomes and cytosol: major role of glutathione S-transferase M1-1 isoenzyme
PublicationThis work is the next step in studying the interplay between C-2028 (anticancer-active unsymmetrical bisacridine developed in our group) and the glutathione S-transferase/glutathione (GST/GSH) system. Here, we analyzed the concentration- and pH-dependent GSH conjugation of C-2028 in rat liver microsomes and cytosol. We also applied three recombinant human GST isoenzymes, which altered expression was found in various tumors. The...
-
Toward better understanding of phosphoryl transfer reaction: the use of phosphoroorganic biocides in research studies
PublicationZamierzeniem autora było nakreślenie potencjalnych kierunków rozwoju badań z wykorzystaniem biocydów fosforoorganicznych (BFO) i związanej z nimi reakcji przeniesienia grupy fosforylowej (reakcja FT). Projektowane są nowe, wysoce selektywne inhibitory enzymów, które w pełni wyjaśniają rolę enzymów w warunkach normalnego funkcjonowania i w procesach patologicznych. Pozwoli to w konsekwencji na wyselekcjonowanie nowych terapeutyków...
-
Oznaczanie tlenu – od metody Winklera do czujników enzymatycznych (Determination of oxygen – from Winkler Method to enzymatic sensor)
PublicationMonitoring of dioxygen levels is of utmost importance from the view-point of life processes, medical diagnostics, nutrition and chemical industries. In all these measurements both low and high levels of this element are important. The common methods for the determination of dioxygen are the Winkler method, Clark electrode and pulsoxymeters. A new, already strong field of research can be now recognized – the development of miniaturized...
-
Jak leczymy pacjenta z nowo rozpoznaną amyloidozą łańcuchów lekkich pośredniego ryzyka? Rola doksycykliny w terapii amyloidozy z zajęciem serca
Publication -
Reactive metabolites of acridinone antitumor agents, C-1311 and C-1305, are trapped within the active site of CYP1A2 and CYP3A4, causing irreversible enzymes inactivation
PublicationZwiązki C-1305 i C-1311, zsyntetyzowane w Katedrze Technologii Leków i Biochemii, wykazują najsilniejsze właściwości przeciwnowotworowe wśród pochodnych, odpowiednio, triazolo- i imidazoakrydonu. Obecnie prowadzone są badania mające na celu określenie biochemicznego mechanizmu działania, jak również potencjalnych szlaków biotransformacji C-1305 i C-1311.W bieżącym etapie podjęto próbę określenia mechanizmu obserwowanej inhibicji...
-
Hybrid biobattery based on arylated carbon nanotubes and laccase
PublicationJednościenne nanorurki węglowe modyfikowano resztami antracenu i antrachinonu Otrzymany materiał posłużył do modyfikacji elektrody węglowej w celu jej zastosowania do redukcji tlenu w bioogniwie paliwowym. Nanorurki z aromatycznymi grupami zwiększyły powierzchnię elektrody oraz przyczyniły się do zwiększenia bezpośredniego przeniesienia elektronów. Grupy arylowe mogą wnikać do hydrofobowej kieszeni enzymu, w której znajduje się...
-
The effect of cabbage juice and it's active components on the protein level and expression of CYP19 in MCF-7 breast cancer cells
PublicationWiadomo, że bioaktywne skladniki kapusty mają chemoprewencyjne działanie w przypadku nowotworów piersi, między innymi ze względu na hamowanie aktywności enzymu aromatazy uczestniczącego w biosyntezie estrogenów. Badania prowadzono przy użyciu komórek raka piersi i stwierdzono, że soki z kapusty, zarówno pochodzącej z uprawy ekologicznej jak i przemysłowej, znacząco hamowały ekspresję genu CYP19 kodującego wspomniany enzym. Sugeruje...
-
New effective sources of lysostaphin Staphylococcus simulans
PublicationLizostafyna jest białkiem posiadającym zdolność lizowania ścian komórkowych bakterii z rodzaju Staphylococcus. W pracy przedstawiono konstrukcje dwóch kolejnych układów ekspresyjnych umożliwiających otrzymywanie rekombinantowej lizostafyny w komórkach bakterii Escherichia coli, metodykę oczyszczania białka oraz jego charakterystykę biochemiczną.
-
Metabolic transformation of antitumor agent C1311 with various fractions of rat liver.
PublicationWykazano, że enzymatyczna aktywacja jest konieczna dla aktywności bilogicznej pochodnej C-1311. Zbadano przemiany związku w obecności różnych frakcji enzymatycznych mikrosomalnych komórek wątroby szczura.Badania te wykazały, że związek C-1311 jest bardziej podatny na transformację pod wpływem frakcji aktywowanych enzymów mikrosomalnych (CYP1A, CYP2B, CYP3A i CYP4A) niż frakcji S9, cytozolowej czy mikrosomów nieaktywowanych. Związek...
-
Cloning, expression, and biochemical characterization of a coldactive GDSL-esterase of a Pseudomonas sp. S9 isolated from Spitsbergen island soil
PublicationAn estS9 gene, encoding an esterase of the psychrotolerant bacterium Pseudomonas sp. S9 was cloned and sequenced. The deduced sequence revealed a protein of 636 amino acid residues with a molecular mass of 69 kDa.Further amino acid sequence analysis revealed that the EstS9 enzyme contained a G-D-S-L motif centered at a catalytic serine, an N-terminal catalytic domain and a C-terminal autotransporter domain. Two recombinant E. coli...
-
Photoprotection and Antiaging Activity of Extracts from Honeybush (Cyclopia sp.)—In Vitro Wound Healing and Inhibition of the Skin Extracellular Matrix Enzymes: Tyrosinase, Collagenase, Elastase and Hyaluronidase
Publication -
Thermostable beta-glucosidase with a broad substrate specifity suitable for processing of lactose-containing products.
PublicationHipertermofilny archeon Sulfolobus shibatae wytwarza termostabilną beta glukozydazę przydatną do hydrolizy laktozy w mleku i serwatce przejawiającą największą aktywność w 85 stC przy pH 5,5. Aktywność ekstraktu bezkomórkowego Sulfolobus shibatae wynosi 0.29 U/mg białka i może być 17-krotnie zwiększona poprzez frakcjonowanie siarczanem amonu, chromatografię jonowymienną i filtrację żelową. Badany enzym ma dużą termostabilność i...
-
porównanie sinigriny i glukotrapeoliny jako substratów podczas oznaczania aktywności enzymatycznej mirozynazy
PublicationMirozynaza jest ważnym enzymem dla przebiegu procesu biofumigacji. Dzięki opracowaniu metodyki oznaczania aktywności tego enzymu, możliwe będą dalsze badania nad optymalizacją procesu hydrolizy glukozynolanów do izotiocyjnianów, które są związkami o największym znaczeniu w nauralnej ochronie roślin. W badaniach zastosowano dwie metody oznaczania aktywności enzymatycznej mirozynazy - metodę spektrofotometryczną i pH-statyczną, oraz...
-
Beta-Galactosidases of Pseudoalteromonas sp. – Characteristics and application for lactose hydrolysis and galactopyranosides synthesis
PublicationBeta-galactosidase [EC 3.2.1.23] is an enzyme that catalyzes the hydrolysis of O-glycosidic linkages in galactosides. It has biotechnological applications in the dairy industry for the production of milk with a low content of lactose and galactooligosacharides for use in healthy food. The transgalactosylation activity of beta-galactosidase can be used in the synthesis of alkyl galactopyranosides. Due to the fact that conditions of...
-
Mikroorganizmy w degradacji celulozy
PublicationCeluloza jest podstawowym składnikiem komórek roślinnych. Włókna celulozowe są bardzo ciasno upakowane w ścianach komórek, przez co utrudniają dostęp enzymom celulolitycznym oraz cząsteczkom wody. Najważniejszą rolę w procesie rozkładu celulozy pełnią celulazy, które należą do rodziny hydrolaz glikozydowych. Zdolność do hydrolizy celulozy i hemicelulozy wykazują mikroorganizmy celulolityczne. Prezentują one dwa różne mechanizmy...
-
Expression of a GDSL esterase from Pseudomonas sp. S9 in Pichiapastoris
PublicationCold active lipolytic enzymes are promising to replace the conventional enzymes processes of biotechnological industries. One of the most important feature of the cold-active lipases and esterases is that they offer economic benefits through energy saving. In general, they exhibit high activity at low temperatures and low thermostability at moderate temperatures. Lipolytic enzyme EstS9 was isolated from Pseudomonas sp. S9. A multiple...
-
INFOGEST inter-laboratory recommendations for assaying gastric and pancreatic lipases activities prior to in vitro digestion studies
PublicationIn vitro digestion studies often use animal digestive enzyme extracts as substitutes of human gastric and pancreatic secretions. Pancreatin from porcine origin is thus commonly used to provide relevant pancreatic enzymes such as proteases, amylase and lipase. Rabbit gastric extracts (RGE) have been recently introduced to provide gastric lipase in addition to pepsin. Before preparing simulated gastric and pancreatic extracts with...
-
Characterization of two aminotransferases from Candida albicans
PublicationAminoadipate aminotransferase (AmAA) is an enzyme of α-aminoadipate pathway (AAP) for l-lysine biosynthesis. AmAA may also participated in biosynthesis or degradation of aromatic amino acids and in d-tryptophan based pigment production. The AAP is unique for fungal microorganisms. Enzymes involved in this pathway have specific structures and properties. These features can be used as potential molecular markers. Enzymes catalyzing...
-
Przemiany metaboliczne in vitro niesymetrycznych bisakrydyn w układach bezkomórkowych i w komórkach nowotworowych oraz określenie wpływu tych pochodnych na aktywność enzymów metabolizujących leki
PublicationPrzedmiotem badań prowadzonych w ramach niniejszej pracy doktorskiej są cztery niesymetryczne bisakrydyny: C-2028, C-2041, C-2045 i C-2053, wykazujące wysoką aktywność cytotoksyczną [Konopa i in. 2019]. Otrzymane wyniki wskazały, że każdy z pierścieni (imidazoakrydonu i 1-nitroakrydyny) obecny w strukturze badanych związków odgrywa inną rolę w wykazywanych przez nie właściwościach fizykochemicznych i biologicznych. Właściwości...
-
Interakcje składników żywności. Rozdział 7
PublicationWpływ na interakcje składników żywności w czasie przechowywania i przetwarzania mają struktury komórkowe i subkomórkowe w których te składniki występują, enzymy i inhibitory enzymów, promieniowanie UV i jonizujące, temperatura, ciśnienie, rodniki, aktywne formy tlenu, sensybilizatory, przeciwutleniacze, wielowartościowe kationy, aktywność wody, siła jonowa, kwasowość i lepkość środowiska. Interakcje składników wpływają na barwę...
-
Toxoplasma gondii: Chimeric Dr fimbriae as a recombinant vaccine against toxoplasmosis
PublicationW publikacji przedstawiono protekcyjne i immunogenne właściowści chimerycznych fimbrii typu Dr zawierających sekwencje epitopowe antygenów SAG1, MAG1 oraz GRA1 Toxoplasma gondii. Uzyskane wyniki porównano z właściwościami immunogennymi antygenowych białek rekombinantowych oraz poliwalentnego antygenu natywnego. Antygeny rekombinantowe indukują silną odpowiedź immunologiczną i w 89% zapobiegają formowaniu się cyst w mózgu myszy....
-
Usefulness of Toxoplasma gondii recombinant antigens (GRA1, GRA7 and SAG1) in an immunoglobulin G avidity test for the serodiagnosis of toxoplasmosis
PublicationOpisano wykorzystanie mieszanki trzech antygenów rekombinantowych (GRA1, GRA7 i SAG1) Toxoplasma gondii w serodiagnostyce toksoplazmozy z wykorzystaniem oznaczenia awidności przeciwciał klasy IgG. Zastosowana mieszanka może z powodzeniem zastąpić całkowity lizat antygenów natywnych który obecnie stosowany jest w komercyjnie dostępnych zestawach. Ponadto wykazano, że zastosowane antgeny rekombinantowe różnicują fazy choroby lepiej...
-
Wykorzystanie komórek Escherichia coli transformowanych genem termostabilnej beta-galaktozydazy z Pyrococcus woesei do wytwarzania galaktozylofruktozy
PublicationKomórki rekombinantowej Escherichia coli transformowane genem beta-galaktozydazy z Pyrococcus woesei wykorzystano jako biokatalizator syntezy galaktozylofruktozy. Największą aktywność syntezy wymienionego prebiotyku (7,6 g/L x godz)uzyskano w 80C przy pH 5,4, stosując jako substrat roztwór zawierający 10% laktozy i 20% fruktozy. Aktywność transgalaktozylacji nie ulegała istotnym zmianom podczas sześciu kolejnych szarż produkcyjnych.
-
Cloning of the thermostable alpha-amylase gene from Pyrococcus woesei in Escherichia coli.
PublicationGen kodujący alfa-amylazę z Pyrococcus woesei klonowano do plazmidów pET21d(+)lub pYTB2, którymi transformowano komórki Escherichia coli. Otrzymana rekombinantowa alfa amylaza wykazuje maksymalną aktywność przy pH 5.6 w temperaturze 95 stC i przejawia około 24 % początkowej aktywności nawet po 2 godz. inkubacji w 120 stC. Duża termostabilność otrzymanego preparatu świadczy o jego przydatności do enzymatycznego upłynniania skrobi.
-
Enzymatic cross-linking of β-lactoglobulin in solution and at air–water interface: Structural constraints
PublicationEffective and controlled use of cross-linking enzymes in structure engineering of food systems depends on characterization of the favorable conditions for enzyme-substrate complex and the limiting factors for the desired modification. In this respect, we analyzed the susceptibility of bovine β-lactoglobulin (BLG) to enzymatic cross-linking by Trichoderma reesei tyrosinase (TrTyr) and transglutaminase (TG). Changes in BLG molecular...
-
Józef Kur prof. dr hab.
People -
Acridinone antitumor agents: C-1311, C-1330 and C-1305 are metabolized by flavin-containing monooxygenase isoenzymes: FMO1, FMO3 and FMO5 with different rates
PublicationRekombinantowe ludzkie monooksygenazy flawinowe: FMO1, FMO3, FMO5 indukują przemiany metaboliczne wybranych do badań pochodnych akrydonu. Biotransformacja związków C-1311, C-1330 i C-1305 przez FMO prowadzi do jednego produktu o strukturze N-tlenku. Wyniki badań wskazują, że najbardziej podatna na przemiany wobec FMO jest pochodna triazoloakrydonu C-1305. Wydaje się więc, że głównymi enzymami pierwszej fazy przemian metabolicznych...
-
Synthesis and biological evaluation of thiophosphate tricyclic coumarin derivatives as steroid sulfatase inhibitors
PublicationSteroid sulfatase (STS) enzyme inhibition is an important approach to the management of hormone-dependent breast cancer. In this paper, we report convenient methods for the synthesis and biological evaluation of thiophosphate tricyclic coumarin analogs exhibiting STS activity. The described methods are based on the straightforward preparation of 7-hydroxy-2,3-dihydro-1H-cyclopenta[c]chromen-2-one, 3-hydroxy- 7,8,9,10-tetrahydro-6H-benzo[c]chromen-6-one,...
-
Molecular modelling of a psychrophilic β-galactosidase
PublicationAntarktyczny szczep, gram-ujemnych bakterii, wyizolowanych z przewodu pokarmowego kryla z gatunku Thyssanoessa macrura, sklasyfikowany na podstawie analizy sekwencji nukleotydowej geny 16S rDNA jako Pseudoalteromonas sp. 22b jest producentem wewnątrzkomórkowej zimnolubnej beta-galaktozydazy. Ponieważ enzym ten wykazuje wysoką aktywność katalityczną w zakresie temperatur od 0 do 30 stC, stanowi on atrakcyjny biokatalizator, użyteczny...
-
A new Thermus sp. class-IIS enzyme subfamily: isolation of a ''twin'' endo nuclease TspDTI with a novel specificity 5´-ATGAA(N11/9)-3´, related to TspGWI, Taqll and Tth111II. 5´-ATGAA(N11/9)-3´, spokrewnionej z TspGWI, TaqII i Tth111II.
PublicationOdkryto i scharakteryzowano nową subrodzinę enzymów klasy IIS z Thermus sp.
-
Reduktaza NADPH:cytochrom P450 - nie tylko partner cytochromu P450.
PublicationReduktaza NADPH:cytochrom P450 (CPR) zlokalizowana w siateczce śródplazmatycznej większości komórek eukariotycznych jest przedstawicielem rodziny reduktaz diflawinowych. Białko CPR składa się z trzech domen. Jedna z nich, na C-końcu, wiąże cząsteczkę FAD i NADPH, druga, na N-końcu, cząsteczkę FMN, trzecia jest domeną regulacyjną. Enzym ten posiada zdolność jednoczesnego przyjmowania dwóch równoważników jonu hydroniowego z NADPH...
-
The role of cytochrome P450 reductase (CPR) in metabolism of potent nitroacridine antitumor, C-1748
PublicationCelem pracy było poznanie molekularnego mechanizmu działania pochodnych 9-amino-1-nitroakrydyny. Zbadano przemiany enzymatyczne tych związków w różnych układach enzymatycznych: I. Szczurza frakcja mikrosomalna z reduktazą cytochromu P450. II. Rekombinantowe izoenzymy cytochromu P450 z wysokim i niskim poziomem reduktazy cytochromu P450. III. Frakcje mikrosomalne dzikiego typu oraz pozbawione genu kodującego reduktazę cytochromu...
-
Construction and purification of his6-Thermus thermophilus MutS protein.
PublicationGen mutS z termofilnej bakterii Thermus thermophilus zamplifikowano przy użyciu PCR, sklonowano i przeprowadzono jego ekspresję w E. coli. Rekombinantowe białko MutS zawierające oligohistydynową domenę na N-końcu oczyszczono w jednoetapowej procedurze przy wykorzystaniu chromatografii powinowactwaNi(2+). Zdolność do rozpoznania niekomplementarności białka his(6)-MutS potwierdzono w eksperymentach ochrony DNA przed trawieniem...
-
Tri-tert-butoksysilanotiolanowe kompleksy cynku(II), kadmu(II) i kobaltu(II) jako modele koordynacji jonu cynku w miejscu aktywnym dehydrogenazy alkoholowej i niektórych innych enzymów
PublicationDehydrogenaza alkoholowa (ADH) katalizuje odwracalne utlenienie alkoholi do aldehydów przy użyciu NAD+ co można podsumować równaniem:R1R2CHOH + NAD+ = R1R2CO + NADH + H+. Geometria koordynacyjna cynku w miejscu aktywnym ADH opisywana jest na ogół jako tetraedryczna jednak istnieją również przesłanki wskazujące na poszerzanie sfery koordynacyjnej metalu w cyklu katalitycznym do LK=5. W pracy przeglądowej opisano badania nad syntetycznymi,...
-
Prediction of Bioactive Peptides From Chicken Feather and Pig Hair Keratins Using In Silico Analysis Based on Fragmentomic Approach
PublicationBackground: Keratin is among the most abundant structural proteins of animal origin, however it remains broadly underutilized. Objective: Bioinformatic investigation was performed to evaluate selected keratins originating from mass-produced waste products, i.e., chicken feathers and pig hair, as potential sources of bioactive peptides. Methods: Pepsin, trypsin, chymotrypsin, papain, and subtilisin were used for in silico keratinolysis...
-
Toxoplasma gondii: Usefulness of ROP1 recombinant antigen in an immunoglobulin G avidity assay for diagnosis of acute toxoplasmosis in humans
PublicationWyniki zawarte w niniejszej pracy pokazują, iż antygen rekombinantowy ROP1 Toxoplasma gondii może być użyteczny w wykrywaniu wczesnej fazy toksoplazmozy z zastosowaniem testu oznaczania awidności przeciwciał klasy IgG. W przeprowadzonych badaniach wykazano, że specyficzne przeciwciała o niskiej awidności były wykrywane w surowicach pacjentów z wczesną fazą choroby, natomiast przeciwciała o wysokiej awidności lub ich brak notowano...
-
DNA adduct formation by C-1748, a potent antitumor 4-methyl-1-nitroacridine of lowered toxicity.
Publication4-podstawione 1-nitroakrydyny reprezentują nową grupę pochodnych zsyntetyzowanych na Politechnice Gdańskiej. W porównaniu do macierzystych 1-nitroakrydyn związki te wykazują obniżoną toksyczność i podwyższoną aktywność przeciwnowotworową. Wiodąca pochodna 4-metylo-1-nitroakrydyna o symbolu C-1748 jest obecnie w przygotowaniu do I fazy badań klinicznych w leczeniu raka okrężnicy. Wprowadzenie elektrodonorowej grupy metylowej w...
-
Effect of antitumor compounds on the yeast topoisomerase II relaxation activity
Open Research DataThe datasets contain results of antitumor compounds* (known inhibitors of human topoisomerase alpha II) inhibitory activity against yeast topoisomerase II. DNA topoisomerases (Topo) are enzymes that catalyze changes in the spatial structure of DNA and play an important role in replication, transcription and recombination. Beyond their normal functions,...
-
3D polypyrrole structures as a sensing material for glucose detection
PublicationIn this work, 3D polypyrrole (PPy) structures as material for glucose detection is proposed. Polypyrrole was electrochemically polymerized on platinum screen-printed electrode from an aqueous solution of lithium perchlorate and pyrrole. The growth mechanism of such PPy structures was studied by ex-situ scanning electron microscopy. Preliminary studies show that studied here PPy film is a good candidate as a sensing material for...
-
THE GENE CLONING, OVEREXPRESSION, PURIFICATION AND BIOCHEMICAL CHARACTERISATION OF A NEW COLD-ADAPTED β–GALACTOSIDASE FROM ARTHROBACTER SP. VII-4
PublicationINTRODUCTION. β-Galactosidase [EC 3.2.1.23] is an enzyme that catalyzes the hydrolysis of O-glycosidic linkages in galactosides. It is commercially used in dairy industry for the production of milk with reduced lactose content. Potentially, the best method for lactose removal under cooling conditions should be carried out with a cold-adapted enzyme. AIM. The aim of this study was to determine the taxonomic affiliation of the isolate...
-
Isolation of the GFA1 gene encoding glucosamine-6-phosphate synthase of Sporothrix schenckii and its expression in Saccharomyces cerevisiae
PublicationGlucosamine-6-phosphate synthase (GlcN-6-P synthase) is an essential enzyme involved in cell wall biogenesis that has been proposed as a strategic target for antifungal chemotherapy. Here we describe the cloning and functional characterization of Sporothrix schenckii GFA1 gene which was isolated from a genomic library of the fungus. The gene encodes a predicted protein of 708 amino acids that is homologous to GlcN-6-P synthases...
-
Sporothrix schenckii: purification and partial biochemical characterisation of glucosamine-6-phosphate synthase, a potential antifungal target
PublicationW artykule opisano izolację i charakterystykę właściwości natywnego enzymu, syntazy GlcN-6-P z komórek dimorficznego grzyba patogennego Sporothrix schenckii. Masę cząsteczkową enzymu natywnego określono na 350 kDa, a enzymu zdenaturowanego na około 79 kDa, co sugeruje homotetrameryczną strukturę białka. Wartość punktu izoelektrycznego wyniosła 6,26; wyznaczono także parametry kinetyczne katalizowanej reakcji. Aktywność enzymu była...
-
Homoisocitrate dehydrogenase from Candida albicans: properties, inhibition, and targeting by an antifungal pro-drug
PublicationThe LYS12 gene from Candida albicans, coding for homoisocitrate dehydrogenase was cloned and expressed as a His-tagged protein in Escherichia coli. The purified gene product catalyzes the Mg2+- and K+-dependent oxidative decarboxylation of homoisocitrate to alpha-ketoadipate. The recombinant enzyme demonstrates strict specificity for homoisocitrate. SDS-PAGE of CaHIcDH revealed its molecular mass of 42.6±1 kDa, while in size-exclusion...
-
Green chemical and hybrid enzymatic pretreatments for lignocellulosic biorefineries: Mechanism and challenges
PublicationThe greener chemical and enzymatic pretreatments for lignocellulosic biomasses are portraying a crucial role owing to their recalcitrant nature. Traditional pretreatments lead to partial degradation of lignin and hemicellulose moieties from the pretreated biomass. But it still restricts the enzyme accessibility for the digestibility towards the celluloses and the interaction of lignin-enzymes, nonproductively. Moreover, incursion...
-
A standardised static in vitro digestion method suitable for food – an international consensus
PublicationSimulated gastro-intestinal digestion is widely employed in many fields of food and nutritional sciences, as conducting human trials are often costly, resource intensive, and ethically disputable. As a consequence, in vitro alternatives that determine endpoints such as the bioaccessibility of nutrients and non-nutrients or the digestibility of macronutrients (e.g. lipids, proteins and carbohydrates) are used for screening and building...